[发明专利]一种适配体组合文库、其构建方法及用途

摘要

本发明提供提供一种构建适配体组合文库的方法、基于上述构建适配体组合文库的方法构建的适配体组合文库、通过所构建的适配体组合文库筛选适配体的方法、以及通过上述筛选方法筛选获得的适配体。本发明提供的构建适配体组合文库的方法，采用高效的结构剪裁方式构建内含较少序列的组合文库，所构建的适配体组合文库涵盖了能产生特异亲和作用的大多数可能范围。本发明筛选得到亲和力更优、无冗余序列的最短适配体活性序列。

主权项

1.一种构建适配体组合文库的方法，包括以下步骤：提供具有N个碱基的待优化适配体，以待优化适配体作为初始序列；构建第一分子群，其包含n₁个分子，所述n₁个分子各自为初始序列的5’末端截短体，并且每一个分子相对于初始序列具有不同的5’末端截短长度；构建第二分子群，其包含n₂个分子，所述n₂个分子各自为初始序列的3’末端截短体，并且每一个分子相对于初始序列具有不同的3’末端截短长度；构建第三分子群，其包含n₃个分子，所述n₃个分子各自为初始序列的5’和3’末端同时截短的截短体，在一个分子中5’和3’末端截短长度相同，并且每一个分子相对于初始序列具有不同的末端截短长度；任选地，构建第四分子群，其包含n₄个分子，当初始序列能够形成茎环结构时，所述n₄个分子各自为初始序列的环部序列延长体，所述环部序列延长体不包括初始序列的茎部序列，在5’末端包含1～n₄个第一序列，且在3’末端包含1～n₄个第二序列，所述第二序列是第一序列的反向互补序列，在一个分子中5’末端包含的第一序列和3’末端包含的第二序列数量相同，并且每一个分子相对于初始序列具有不同的末端延长长度；当初始序列不能形成茎环结构时，所述n₄个分子各自为初始序列的延长体，所述延长体的5’末端包含1～n₄个第一序列，且在3’末端包含1～n₄个第二序列，所述第二序列为第一序列的反向互补序列，在一个分子中5’末端包含的第一序列和3’末端包含的第二序列数量相同，并且每一个分子相对于初始序列具有不同的末端延长长度，所述第一序列的长度为1个或多个碱基，其中，N为大于零的整数，n₁、n₂、n₃、n₄各自独立地为大于零且小于或等于N的整数。