[发明专利]一种耐高盐高产酯酵母融合子的制备方法有效
| 申请号： | 201611142403.5 | 申请日： | 2016-12-13 |
| 公开（公告）号： | CN106947757B | 公开（公告）日： | 2020-05-01 |
| 发明（设计）人： | 朱晓立;谭才邓;庄玉洪;张银冰;杜淑霞 | 申请（专利权）人： | 广东轻工职业技术学院 |
| 主分类号： | C12N15/04 | 分类号： | C12N15/04;C12N13/00;A23L27/50;C12R1/645;C12R1/88 |
| 代理公司： | 广州市华学知识产权代理有限公司 44245 | 代理人： | 苏运贞;裘晖 |
| 地址： | 510300 广东*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种耐高盐高产酯酵母融合子的制备方法。本发明通过热处理灭活汉逊德巴利酵母原生质体，紫外线灭活莫格球拟酵母原生质体；将灭活后的汉逊德巴利酵母原生质体和莫格球拟酵母原生质体进行电融合，然后进行培养，得到融合子，将融合子接种于含26％(w/w)NaCl的培养基培养发酵，检测发酵得到的产物的酯含量；同时检测融合子的生长速度，得到耐高盐高产酯酵母融合子。本发明提供的方法是原生质体电融合酵母选育方法，无细胞壁障碍，细胞融合频率高，从而使基因重组的频率也高，得到的融合子具有亲本的优点，耐高盐、高产酯以及耐高温。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 耐高盐 高产 酵母 融合 制备 方法 | ||
【主权项】：
一种耐高盐高产酯酵母融合子的制备方法，其特征在于包括如下步骤：(1)活化菌种：对汉逊德巴利酵母和莫格球拟酵母活化；(2)制备原生质体：将活化后的汉逊德巴利酵母和莫格球拟酵母的细胞壁去除，分别得到汉逊德巴利酵母原生质体和莫格球拟酵母原生质体；(3)灭活原生质体：①通过热处理灭活汉逊德巴利酵母原生质体，使其灭活效率达到100％；②通过紫外线灭活莫格球拟酵母原生质体，使其灭活效率达到100％；(4)电融合灭活原生质体：将灭活后的汉逊德巴利酵母原生质体和莫格球拟酵母原生质体进行电融合，然后进行培养，得到融合子；(5)筛选融合子：将融合子接种于含26％(w/w)NaCl的培养基培养发酵，检测发酵得到的产物的酯含量；同时检测融合子的生长速度，得到耐高盐高产酯酵母融合子。
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