[发明专利]一种诱导西藏绵头雪莲愈伤组织产生花青素的方法

摘要

本发明公开了一种诱导西藏绵头雪莲愈伤组织产生花青素的方法。本发明以西藏绵头雪莲种子为材料，通过组织培养技术诱导愈伤组织，筛选得到花青素高产且遗传稳定细胞系。本发明筛选的绵头雪莲愈伤组织细胞系在常温下生长快，遗传特性稳定，继代培养15‑20天即可获得大量增殖细胞，在改变培养条件的情况下可诱导西藏绵头雪莲愈伤组织产生花青素，实现了常温大量培养与诱导花青素相结合的二段式培养方式，不仅解决了细胞生长与次生代谢产物积累的矛盾问题，也解决了花青素生产的原料问题，可实现雪莲花青素的工业化生产，并且生产成本低，培养周期短，不受自然环境及气候的影响，可以实现周年生产，具有重要理论意义及广阔的市场应用前景。

主权项

1.一种雪莲愈伤组织细胞系的制备方法，包括如下步骤：(1)将雪莲的外植体在愈伤组织诱导培养基上进行诱导培养，得到愈伤组织；(2)将所述愈伤组织在愈伤组织继代培养基上进行继代培养，得到雪莲愈伤组织细胞系；所述雪莲为西藏绵头雪莲；所述愈伤组织诱导培养基和所述愈伤组织继代培养基中的溶质均包括6‑BA和NAA；所述6‑BA在所述愈伤组织诱导培养基中的浓度为1‑1.5mg/L；所述NAA在所述愈伤组织诱导培养基中的浓度为1.5‑2mg/L；所述6‑BA在所述愈伤组织继代培养基中的浓度为0.5‑1.0mg/L；所述NAA在所述愈伤组织继代培养基中的浓度为1.5‑2mg/L；所述继代培养的方法为将所述愈伤组织在培养温度不断提高的条件下进行温度梯度驯化培养，所述温度梯度为22℃、24℃、26℃、28℃和30℃，每个温度培养3年。