[发明专利]一种诱导西藏绵头雪莲愈伤组织产生花青素的方法有效
| 申请号： | 201611127132.6 | 申请日： | 2016-12-09 |
| 公开（公告）号： | CN106577279B | 公开（公告）日： | 2018-08-24 |
| 发明（设计）人： | 陈玉珍;卢存福 | 申请（专利权）人： | 北京林业大学 |
| 主分类号： | A01H4/00 | 分类号： | A01H4/00 |
| 代理公司： | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人： | 关畅;白艳 |
| 地址： | 100083 *** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 诱导 西藏 雪莲 组织 产生 花青素 方法 | ||
1.一种雪莲愈伤组织细胞系的制备方法，包括如下步骤：
(1)将雪莲的外植体在愈伤组织诱导培养基上进行诱导培养，得到愈伤组织；
(2)将所述愈伤组织在愈伤组织继代培养基上进行继代培养，得到雪莲愈伤组织细胞系；
所述雪莲为西藏绵头雪莲；
所述愈伤组织诱导培养基和所述愈伤组织继代培养基中的溶质均包括6-BA和NAA；
所述6-BA在所述愈伤组织诱导培养基中的浓度为1-1.5mg/L；
所述NAA在所述愈伤组织诱导培养基中的浓度为1.5-2mg/L；
所述6-BA在所述愈伤组织继代培养基中的浓度为0.5-1.0mg/L；
所述NAA在所述愈伤组织继代培养基中的浓度为1.5-2mg/L；
所述继代培养的方法为将所述愈伤组织在培养温度不断提高的条件下进行温度梯度驯化培养，所述温度梯度为22℃、24℃、26℃、28℃和30℃，每个温度培养3年。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：
所述愈伤组织诱导培养基和所述愈伤组织继代培养基均是将基础培养基、6-BA、NAA、蔗糖、凝固剂和水混匀得到的培养基；
所述凝固剂为琼脂；
所述蔗糖在愈伤组织诱导培养基和所述愈伤组织继代培养基中的浓度均为25-30g/L；
所述琼脂在愈伤组织诱导培养基和所述愈伤组织继代培养基中的浓度均为6.5-7.0g/L。
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：
所述6-BA在所述愈伤组织诱导培养基中的浓度为1mg/L；
所述NAA在所述愈伤组织诱导培养基中的浓度为1.5mg/L；
所述6-BA在所述愈伤组织继代培养基中的浓度为0.5mg/L；
所述NAA在所述愈伤组织继代培养基中的浓度为1.5mg/L；
所述蔗糖在愈伤组织诱导培养基和所述愈伤组织继代培养基中的浓度均为30g/L；
所述琼脂在愈伤组织诱导培养基和所述愈伤组织继代培养基中的浓度均为6.5g/L。
4.根据权利要求1-3中任一所述的方法，其特征在于：
所述培养基的pH均为5.7-5.9；
所述诱导培养的条件为：21-23℃、黑暗；
所述继代培养的条件为：避光。
5.根据权利要求1-3中任一所述的方法，其特征在于：所述雪莲的外植体为雪莲的根、茎或叶片。
6.一种产生花青素的方法，包括诱导培养利用权利要求1-5任一所述方法制备获得的细胞系的步骤；所述诱导培养的条件为低温、黑暗；
所述低温为4℃。
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