[发明专利]伊木萨克片作用于异常黏液质证与阳痿病证模型靶点蛋白及其筛选方法

摘要

本发明提供了伊木萨克片作用于异常黏液质证(证候)大鼠后的血清及作用于异常黏液质型阳痿病证大鼠后的血清和阴茎平滑肌组织药物靶点蛋白及其筛选方法，具体包括以下步骤1)正常对照组、证侯组、证候药物组、病证组与病证药物组；2)采集全血，分离血清与阴茎平滑肌组织；3)提取蛋白质；4)标记后纯化；5)质谱检测后得到指纹图谱，筛选后进行蛋白质组学分析，获得上述各组血清和阴茎平滑肌组织蛋白质；6)统计、比较、筛选得到伊木萨克片药物作用靶点蛋白质体系。本发明明确了维医异常黏液质型阳痿的对证维药伊木萨克片的作用靶点，为进一步揭示伊木萨克片作用机制，以及为基于维药伊木萨克片的新药开发及二次开发奠定基础。

主权项

伊木萨克片药物靶点蛋白的筛选方法，其特征在于，包括以下步骤：1)提供正常对照组(N组)、异常黏液质证候组(ZM组)、异常黏液质证候药物组(ZY组)、异常黏液质型病证组(BM组)和异常黏液质型病证药物组(BY组)，N大鼠，对BY组和ZY组大鼠用伊木萨克片喂食2周，BM组、ZM组和N组大鼠喂食水；2)采集所述步骤1)得到的五组大鼠的全血，分离后得到血清；取所述步骤1)得到五组大鼠的阴茎平滑肌组织；3)从所述步骤2)得到的血清和阴茎平滑肌组织中提取蛋白质，检测，得到已知浓度的蛋白质；4)将所述步骤3)中得到的蛋白质用iTRAQ标记试剂盒标记后纯化，得到纯化后肽段；5)将所述步骤4)得到的纯化后的肽段经质谱检测后得到指纹图谱，将所述指纹图谱在PD软件中筛选，将所述筛选后的谱图用mascot搜索，根据得到的搜索结果和筛选后的谱图进行定量分析，将得到的分析数据在大鼠数据库中检索，获得大鼠血清差异蛋白质和大鼠阴茎平滑肌组织差异蛋白质；6)将所述步骤5)中得到的血清差异蛋白质和阴茎平滑肌组织差异蛋白质进行伊木萨克片药物靶点蛋白的筛选；所述异常黏液质血清证候组大鼠药物靶点蛋白的差异蛋白的筛选具体是：将所述步骤6)中得到的BM组与N组蛋白质相比较，得到BM/N的差异蛋白质；将ZM组与N组的蛋白质相比较，得到ZM/N的差异蛋白质；将所述ZY组与ZM组的蛋白质相比较，得到ZY/ZM的差异蛋白，统计BM/N、ZM/N和ZY/ZM差异蛋白的同蛋白的种类和数量，得到伊木萨克片作用于异常黏液质证候组大鼠后的血清药物靶点蛋白；所述异常黏液质型阳痿病证组大鼠血清和阴茎平滑肌组织药物靶点蛋白的差异蛋白的筛选具体是：将所述步骤6)中得到的BM组与ZM组蛋白质相比较，得到BM/ZM的差异蛋白质；将BM组与N组的蛋白质相比较，得到BM/N的差异蛋白质；将所述BY组与BM组的蛋白质相比较，得到BY/BM的差异蛋白，统计BM/ZM、BM/N和BY/BM差异蛋白的同蛋白的种类和数量，得到伊木萨克片作用于异常黏液质型阳痿病证组大鼠后的血清和阴茎平滑肌组织药物靶点蛋白。