[发明专利]检测替米考星的酶联免疫试剂盒及其应用

摘要

本发明提供了一种检测替米考星的酶联免疫试剂盒，它包括：包被有包被原的酶标板、替米考星特异性抗体、酶标记物、替米考星标准溶液、底物显色液、终止液、浓缩洗涤液、样本稀释液。本发明还公开了一种应用上述酶联免疫试剂盒检测替米考星的方法，主要包括：先进行样本前处理，再用试剂盒进行检测，最后分析检测结果。本发明的检测试剂盒可应用于动物组织、蜂蜜、鸡蛋和牛奶样本中替米考星的残留量的检测，其操作简便、快速、准确、灵敏度高、费用低廉等，适合大量样本的筛查和现场监控。

主权项

1.一种替米考星酶联免疫检测试剂盒，其包括包被有替米考星药物抗原的酶标板、替米考星特异性抗体、酶标记物、替米考星标准品溶液、底物显色液、终止液、浓缩洗涤液、样本稀释液，其特征在于：所述酶标记物为酶标记抗抗体，所述替米考星特异性抗体是用替米考星药物抗原免疫动物得到的，所述替米考星药物抗原为替米考星半抗原与载体蛋白的偶联物，所述替米考星半抗原的制备方法主要包括如下步骤：(1)取1.0g替米考星，加DMF溶解，加氢化钠0.138g，加2‑(4‑溴丁基)‑1,3‑二氧戊环0.72g，60℃搅拌5h，停止反应，冷却到室温，加水稀释，加适量稀盐酸调节pH值到7，1,2‑二氯乙烷萃取，分去水相，水洗，无水硫酸钠干燥，使用体积比为5:1的正己烷/乙醚重结晶，得到中间产物缩醛替米考星0.95g，收率83.33％，(2)取0.95g中间产物缩醛替米考星加20ml乙醇溶解，加1mol/L稀盐酸10ml，50℃搅拌反应4h，停止反应，加碳酸氢钠水溶液，调节pH值到7，加乙酸乙酯萃取，水洗，无水硫酸钠干燥，蒸干，上硅胶柱，使用体积比为5:1的二氯甲烷/甲醇洗脱分离，得到戊醛替米考星半抗原产物0.8g，收率88.9％；所述替米考星半抗原的分子结构式为：