[发明专利]检测替米考星的酶联免疫试剂盒及其应用有效
申请号: | 201611112276.4 | 申请日: | 2016-12-07 |
公开(公告)号: | CN106610433B | 公开(公告)日: | 2018-08-10 |
发明(设计)人: | 何方洋;万宇平;吴小胜;杨昌松;刘萤;赵正苗;王佩月;龙光宗;曹东山 | 申请(专利权)人: | 北京勤邦生物技术有限公司 |
主分类号: | G01N33/577 | 分类号: | G01N33/577;G01N33/535;G01N21/31 |
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地址: | 102206 北京市昌平*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 检测 替米考星 免疫 试剂盒 及其 应用 | ||
1.一种替米考星酶联免疫检测试剂盒,其包括包被有替米考星药物抗原的酶标板、替米考星特异性抗体、酶标记物、替米考星标准品溶液、底物显色液、终止液、浓缩洗涤液、样本稀释液,其特征在于:所述酶标记物为酶标记抗抗体,所述替米考星特异性抗体是用替米考星药物抗原免疫动物得到的,所述替米考星药物抗原为替米考星半抗原与载体蛋白的偶联物,所述替米考星半抗原的制备方法主要包括如下步骤:
(1)取1.0g替米考星,加DMF溶解,加氢化钠0.138g,加2-(4-溴丁基)-1,3-二氧戊环0.72g,60℃搅拌5h,停止反应,冷却到室温,加水稀释,加适量稀盐酸调节pH值到7,1,2-二氯乙烷萃取,分去水相,水洗,无水硫酸钠干燥,使用体积比为5:1的正己烷/乙醚重结晶,得到中间产物缩醛替米考星0.95g,收率83.33%,
(2)取0.95g中间产物缩醛替米考星加20ml乙醇溶解,加1mol/L稀盐酸10ml,50℃搅拌反应4h,停止反应,加碳酸氢钠水溶液,调节pH值到7,加乙酸乙酯萃取,水洗,无水硫酸钠干燥,蒸干,上硅胶柱,使用体积比为5:1的二氯甲烷/甲醇洗脱分离,得到戊醛替米考星半抗原产物0.8g,收率88.9%;所述替米考星半抗原的分子结构式为:
2.如权利要求1所述的一种替米考星酶联免疫检测试剂盒,其特征在于:所述载体蛋白为牛血清白蛋白、鼠血清蛋白、兔血清蛋白、甲状腺蛋白、卵清蛋白、血蓝蛋白或人血清白蛋白。
3.如权利要求1所述的一种替米考星酶联免疫检测试剂盒,其特征在于:所述替米考星特异性抗体为替米考星药物单克隆抗体。
4.如权利要求1-3任一项所述的一种替米考星酶联免疫检测试剂盒检测样本中替米考星残留的方法,主要步骤包括:
1)将待测样本进行前处理,得到待测样本溶液;
2)用权利要求1-3任一项所述的替米考星酶联免疫检测试剂盒检测待测样本溶液;
3)分析检测结果。
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