[发明专利]一种滇黄精的组培快繁方法

摘要

本发明公开了一种滇黄精的组培快繁方法，包括外殖体的选择与处理、诱导培养、继代培养、增殖培养、生根培养和炼苗移栽，其中诱导培养基为MS +1.0～3.0mg/L6‑BA+0.5～1.0mg/L2,4‑D+1.0～2.0mg/L赤霉素+5.0～10.0g/L琼脂+20.0～30.0g/L蔗糖；增生根培养基为1/2MS +0.2～1.0mg/LNAA +0.2～0.6mg/LIBA+0.2～0.5%活性炭+5～20%香蕉 +6.0～8.0g/L琼脂+20.0～25.0g/L蔗糖。本发明不仅有效的缩短了种苗培育的时间和成本，提高快繁的速度，而且有效的提高了黄精的繁殖系数，能较好的保持黄精的遗传稳定性，其移栽后的成活率可达到98%以上，创造较好的社会效益和经济效益。

主权项

一种滇黄精的组培快繁方法，其特征在于，包括以下几个步骤：①外殖体的选择与处理:选取成熟、新鲜、无病虫害的滇黄精根茎，用刀切取带芽的根茎置于洗洁精水溶液中浸泡，浸泡1～3min后将其用流水清洗干净，然后用体积分数为70～75%的酒精浸泡1～2min，用无菌水反复冲洗2～3次，最后放入质量分数为0.1～0.3%的氯化汞中反复浸泡灭菌3～5次，每次浸泡的时间为3～5min，每次浸泡后须用无菌水冲洗2～3次,冲洗干净后再用无菌滤纸将无菌水吸干，用刀切去伤口坏死的部分即可进行接种；②诱导培养：将步骤①中消毒处理后的根茎接种于诱导培养基上进行诱导培养，在培养温度为23～28℃，光照强度为2000～2500Lux，光照时间为12～16h/天的条件下培养，培养20～30天后根茎部分膨大，根茎的切口处诱导出淡黄色致密的愈伤组织，所述诱导培养基为：MS基本培养基+1.0～3.0mg/L6‑BA+0.5～1.0mg/L2,4‑D+1.0～2.0mg/L赤霉素+5.0～10.0g/L琼脂+20.0～30.0g/L蔗糖；③继代培养：先将步骤②中诱导出的愈伤组织转接于继代培养基中进行继代培养，在培养温度为23～28℃，光照强度为2000～2500Lux，光照时间为12～16h/天的条件下培养，培养20～30天分化出新的幼芽；所述继代培养基为：MS培养基+3.0～4.5mg/L6‑BA+2.0～3.0mg/L62BA +3.0～5.0mg/L玉米素+0.2～1.0mg/LNAA+1.0～3.0g/L琼脂+5.0～10.0g/L蔗糖；④增殖培养：将步骤③中继代培养成功的带有幼芽的根茎切成0.4～0.8cm3的小块，然后接种于增殖培养基中，在培养温度为23～28℃，光照强度为2000～2500Lux，光照时间为12～16h/天的条件下培养20～30天后获得分化苗；所述增殖培养基为：MS培养基+2.0～4.0mg/L6‑BA+0.5～1.5mg/L2,4D+0.5～1.0 mg/L GA3 +6.0～8.0g/L琼脂+20.0～25.0g/L蔗糖；⑤生根培养：待步骤④中增殖培养得到的分化苗长至2～4cm时，先将分化苗转接到生根培养基上诱导生根，在培养温度为23～28℃，光照强度为2000～2500Lux，光照时间为12～16h/天的条件下培养20～30天后可观察到分化苗长出3～6条根须，根须长度为2～4cm，然后将分化苗移至自然光下培养，培养10天后即可进行组培苗的移栽，所生根培养基为：1/2MS培养基 +0.2～1.0mg/LNAA +0.2～0.6mg/LIBA+0.2～0.5%活性炭+5～20%香蕉 +6.0～8.0g/L琼脂+20.0～25.0g/L蔗糖；⑥炼苗移栽：将步骤⑤中培养得到的组培苗从生根培养基中取出，洗净根部的培养基后，将组培苗移栽至苗床的育苗基质中，移栽初期需搭建小拱棚，覆盖透明塑料布，适当遮荫，保持环境温度20～25℃，空气湿度70～80%，每隔7天喷施1次营养液，15天后除去塑料布，逐渐通风，增加光照，转入常规管理，30～40天即可进行大田移栽。