[发明专利]一种水解胶原蛋白口服液中多肽分子量的快速测定方法

摘要

本发明公开了一种水解胶原蛋白口服液中多肽分子量的快速测定方法，包括以下步骤：(1)制备检测样品：取市售水解胶原蛋白口服液10ml，水解胶原蛋白的质量浓度为105g/L，加入200μL去离子水搅拌均匀，再加入5ml的0.1mol/L的Tris‑HCL缓冲液，2ml的2,5‑二羟基苯甲酸搅拌离心处理后用滤膜进行第一次粗滤，得到滤液；(2)将所得滤液通过特制的凝胶层析柱，经与分子量已知的标准品在相同条件下通过凝胶层析柱来计算待测样品的分子量，计算公式为：Ve＝k₁‑k₂logMr，其中，Ve为洗脱体积，k₁和k₂为常系数，Mr为分子量。

主权项

1.一种水解胶原蛋白口服液中多肽分子量的快速测定方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）制备检测样品：取市售水解胶原蛋白口服液10ml，水解胶原蛋白的质量浓度为105g/L，加入200μL去离子水搅拌均匀，再加入5ml的0.1mol/L的Tris‑HCl缓冲液，2ml的2,5‑二羟基苯甲酸搅拌离心处理后用滤膜进行第一次粗滤，得到滤液；（2）将所得滤液通过特制的凝胶层析柱，经与分子量已知的标准品在相同条件下通过凝胶层析柱来计算待测样品的分子量，计算公式为：Ve=k1‑k2logMr，其中，Ve为洗脱体积，k1和k2为常系数，Mr为分子量；所述（2）中滤液在通过特制的凝胶层析柱前将滤液中加入胃蛋白酶，加酶量为滤液的3%，5℃下搅拌均匀后静置8h，灭酶活后离心处理30min，取上清液；所述特制的凝胶层析柱是将交联葡聚糖、生物胶‑P和蔗渣以1:2：0.015的质量比混合后在无盐水中溶胀20h，先用搅拌棒持续搅拌2h，使三者充分混合均匀，再每两小时间歇搅拌，所述搅拌棒为加热搅拌棒，等其完全溶胀真空抽滤脱气后即可装柱；所述蔗渣经超纤维化处理。