[发明专利]一种荧光定量PCR反应液及方法在审
| 申请号： | 201610958965.0 | 申请日： | 2016-11-03 |
| 公开（公告）号： | CN106498060A | 公开（公告）日： | 2017-03-15 |
| 发明（设计）人： | 黄钧昱 | 申请（专利权）人： | 江苏然科生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 北京众合诚成知识产权代理有限公司11246 | 代理人： | 龚燮英 |
| 地址： | 214072 江苏省*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开一种荧光定量PCR反应液及方法，至少包括普通外切酶活性的DNA聚合酶、基础荧光稳定剂、DNA聚合酶的增强剂以及保护剂。本发明涉及的一种荧光定量PCR反应液具有明显的提高DNA聚合酶5'‑3'外切酶活性的作用，使普通DNA聚合酶能够水解Taqman‑MGB探针，提高扩增效率，保持较强的稳定性。本发明涉及的一种荧光定量PCR反应液在Taqman‑MGB探针应用中具有更强的灵敏度，效果明显优于现有技术，具有非常广阔的市场前景。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 荧光 定量 pcr 反应 方法 | ||
【主权项】：
一种荧光定量PCR反应液，其特征在于：其成分为：10～50mM pH值8.0～8.9的Tris‑HCl，10～60mM的KCl，2～5mM的MgCl2，100～300μM的dNTP，0.025～0.1U/μL的DNA聚合酶，0.5×ROX，5～10％的基础荧光稳定剂，1～3％的DNA聚合酶增强剂，10～30％的DNA聚合酶增强剂的保护剂；所述DNA聚合酶为普通耐热DNA聚合酶，具有5'‑3'聚合酶活性和/或5'‑3'外切酶活性；所述基础荧光稳定剂选自NP‑40、TritonX‑100、NaCl、KCl中的一种或多种组合；所述DNA聚合酶增强剂选自牛血清蛋白、二甲亚砜、甲酰胺、亚精胺、环糊精、甜菜碱中的一种或多种组合；所述DNA聚合酶增强剂的保护剂选自明胶、透明质酸、二硫苏糖醇中的一种或多种组合。
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