[发明专利]一种重组自分泌运动因子的表达方法有效
| 申请号： | 201610953362.1 | 申请日： | 2016-11-03 |
| 公开（公告）号： | CN106754817B | 公开（公告）日： | 2021-02-05 |
| 发明（设计）人： | 赵峰梅;赵邑;张全爱 | 申请（专利权）人： | 山西省生物研究院有限公司 |
| 主分类号： | C12N9/14 | 分类号： | C12N9/14;C12N9/16;C12N15/85 |
| 代理公司： | 太原荣信德知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 14119 | 代理人： | 杨凯;连慧敏 |
| 地址： | 030006 山*** | 国省代码： | 山西;14 |
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| 摘要： | 一种重组自分泌运动因子的表达方法，目的是保持较高活性，高水平表达均一性糖基化修饰；本发明通过构建pInsulator4x‑ATX β‑8His‑DHFR重组表达载体，利用CAG启动子和双顺反子IRES共表达ATX和DHFR基因，引入绝缘子insulator（4X）避免了基因之间的相互影响，通过MTX阶梯式梯度加压筛选大大增加了ATX在HEK293宿主细胞中的重组表达水平；通过控制重组细胞株的接种量、补料方式、培养温度和转速、谷氨酰胺和葡萄糖含量监测及pH值控制，使重组蛋白获得了较为均一性的糖基化修饰，最终ATX蛋白获得12 mg/L的高收率，且保持较高的lysoPLD和PDE活性。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 重组 分泌 运动 因子 表达 方法 | ||
【主权项】：
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