[发明专利]一种干扰素生物学活性的检测方法有效
| 申请号： | 201610928699.7 | 申请日： | 2016-10-31 |
| 公开（公告）号： | CN106546747B | 公开（公告）日： | 2019-03-01 |
| 发明（设计）人： | 马永;何青 | 申请（专利权）人： | 江苏众红生物工程创药研究院有限公司 |
| 主分类号： | G01N33/68 | 分类号： | G01N33/68 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 213125 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明涉及干扰素生物学活性的检测方法，采用猪肾细胞(IBRS‑2)作为测定细胞，水泡性口炎病毒(VSV)作为攻击病毒来检测干扰素活性。本发明方法用于猪IFN‑γ效价测定时能有效解决现有方法中检测猪IFN‑γ效价时存在的不易观察、主观误差大，敏感性差、因种属特异性导致的无法检测活性等问题。但本发明方法并不局限于猪IFN‑γ的效价测定，亦适用于其他猪干扰素效价测定，如猪IFN‑α；同时亦适用于非Ⅱ型人干扰素，如人IFN‑α。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 干扰素 生物学 活性 检测 方法 | ||
【主权项】：
1.干扰素生物学活性的检测方法，其特征在于：所述干扰素为猪IFN‑γ，并采用猪肾细胞IBRS‑2作为测定细胞，水泡性口炎病毒VSV作为攻击病毒来检测猪IFN‑γ活性，具体包括以下步骤：(1)将预先培养好的IBRS‑2单层细胞稀释成细胞密度2×105‑3×105个/mL的细胞悬液，培养；(2)等细胞贴壁后，将干扰素进行4倍梯度稀释，做12个梯度；稀释后的干扰素分别依次加入贴壁的96孔细胞板进行换液，100μL/孔，培养长至均匀单层细胞；(3)弃上清，向每孔中加入VSV病毒液，细胞对照孔加维持液；培养约24h；(4)观察细胞病变，统计各稀释度CPE孔和无CPE孔数；(5)按Reed‑Muench两氏法计算猪干扰素效价。
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