[发明专利]一种提高伪狂犬病病毒同源重组效率和重组病毒筛选的方法在审

专利信息
申请号: 201610909248.9 申请日: 2016-10-18
公开(公告)号: CN106544367A 公开(公告)日: 2017-03-29
发明(设计)人: 琚春梅;潘慧;向柯宇;李艳华;唐栋;程珍珠;吴艳虹 申请(专利权)人: 华南农业大学
主分类号: C12N15/869 分类号: C12N15/869;C12N15/66;C12M1/00
代理公司: 广州粤高专利商标代理有限公司44102 代理人: 林丽明
地址: 510642 广*** 国省代码: 广东;44
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摘要: 发明公开了一种提高伪狂犬病病毒同源重组效率和重组病毒筛选的方法。首先将含有EGFP基因完整表达盒的伪狂犬病病毒AH株转移载体进行酶切线性化后与伪狂犬病病毒AH株同源重组,所得重组病毒的筛选方法为首先分选单个具有荧光的病变宿主细胞,然后通过改良的蚀斑实验进一步筛选。本发明将重组质粒酶切线性化后转染细胞,再进行病毒同源重组,增加了同源重组效率,使用单个细胞吸取和蚀斑纯化相结合的办法极大的缩短了重组病毒的筛选和纯化时间,不仅对提高病毒同源重组效率有重要的意义,在单细胞分离尤其是重组病毒筛选中也具有很好的应用前景,可广泛用于重组病毒的筛选。
搜索关键词: 一种 提高 狂犬病 病毒 同源 重组 效率 筛选 方法
【主权项】:
一种含有EGFP基因完整表达盒的伪狂犬病病毒AH株转移载体,其特征在于,含有伪狂犬病病毒AH株病毒DNA的左右同源臂F1和F2、EGFP基因完整表达盒。
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