[发明专利]提取动物基因组DNA的方法

摘要

本发明公开了一种提取动物基因组DNA的方法。本发明适用于任何动物，其提取效率高效、方便快捷、经济省时，尤其对于不易获得组织肉样、血液的动物，或为了减小动物应激，保护珍惜物种等。本发明成本低廉，一个样品仅需花费0.5元，且提取时间短，单个样品的提取时间为90分钟。

主权项

一种提取动物基因组DNA的方法，其特征在于：包括如下步骤：1)样品采集：采集动物肌肉组织或毛囊，并放置在质量百分比为70％的酒精中，在‑20℃进行保存；2)细胞裂解液配制：细胞裂解液中，按浓度为3.770g/LEDTA‑Na2、1.5764g/L Tris‑HCl、0.5844g/L氯化钠、2.884g/L十二烷基硫酸钠，以ddH2O为溶剂进行配置，配置的溶液充分溶解后，在37℃孵育5min；3)DNA萃取液配制：称取0.6041g的氯化锂溶于950mL的ddH2O中充分溶解，然后定容至1000mL；4)DNA提取：a)取肌肉组织放置于的离心管中，并用充分剪碎；若是毛囊则取5‑8根带毛囊的毛发，用剪去毛干部分，将毛囊置于离心管中；b)向离心管中加入细胞裂解液，轻轻晃荡使组织样品完全浸泡在裂解液中；c)再向离心管中加入蛋白酶K，充分吹打后，振荡18‑22s，在4000‑5000rpm下离心3‑5s；d)之后将离心管在20‑60℃水浴10‑15min；e)向离心管中加入氯化锂，振荡10‑15s，在4000‑5000rpm离心下8‑10s，立即冰浴10‑15min；f)在转速为13000‑14000rpm离心10‑15min，将上清液转移至洁净的离心管中，弃沉淀；g)向上清液中加入预先冷冻过的无水乙醇，轻轻上下颠倒摇晃，室温静置10‑15min沉淀DNA。h)在转速为13000‑14000rpm离心10‑15min，弃上清，用相同体积的质量百分比为70％或75％乙醇洗涤一次；重复上述步骤；i)弃上清，在滤纸上倒置离心管20min，使管内液体与酒精完全去除；或直接置于40‑45℃烘箱烘干10min；j)加入TE或ddH2O溶解DNA，完成DNA的提取。