[发明专利]一种提高大肠杆菌合成血红素的方法有效
| 申请号： | 201610890603.2 | 申请日： | 2016-10-12 |
| 公开（公告）号： | CN106434509B | 公开（公告）日： | 2019-10-25 |
| 发明（设计）人： | 康振;陈坚;堵国成;翁焕娇 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12P17/18;C12N15/66;C12R1/19 |
| 代理公司： | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人： | 张勇 |
| 地址： | 214122 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种提高大肠杆菌合成血红素的方法，属于代谢工程技术领域。本发明通过将来源大肠杆菌的血红素合成途径基因分成两个模块，利用拷贝数不同的质粒，将两个模块随机组合，在过量表达谷氨酰‑tRNA还原酶(hemA编码)、谷氨醛氨基转移酶(hemL编码)的基础上，强化了血红素合成途径。本发明构建的重组大肠杆菌工程菌E.coli DH5α：pUC19‑hemA‑hemL+pACYCDuet‑2‑hemB‑hemC‑hemD‑hemE+pRSFDuet‑2‑hemF‑hemG‑hemH摇瓶发酵培养48h，生产血红素0.56μM/OD细胞。本发明采用代谢工程策略，改造微生物菌株来合成目的产物血红素，为微生物法高效生产血红素奠定了一定基础。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 提高 大肠杆菌 合成 血红素 方法 | ||
【主权项】：
1.一种高产血红素的重组大肠杆菌，其特征在于，包括(a),(b)，(c)，其中(a)是以pRSFDuet‑2为载体串联表达hemB、hemC、hemD和hemE基因，并以pACYCDuet‑2为载体串联表达hemF、hemG和hemH基因；(b)是以pCDFDuet‑2为载体串联表达hemB、hemC、hemD和hemE基因，并以pRSFDuet‑2或pACYCDuet‑2为载体，串联表达hemF、hemG和hemH基因；(c)是以pACYCDuet‑2为载体串联表达hemB、hemC、hemD和hemE基因，并以pRSFDuet‑2或pCDFDuet‑2为载体，串联表达hemF、hemG和hemH基因；所述载体pRSFDuet‑2的核苷酸序列如SEQ ID NO.24所示；所述载体pCDFDuet‑2的核苷酸序列如SEQ ID NO.25所示；所述载体pACYCDuet‑2的核苷酸序列如SEQ ID NO.26所示；所述重组大肠杆菌还以pUC19为载体过量表达hemA和hemL基因。
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