[发明专利]一种增强多糖抗原免疫原性蛋白载体及其制备方法与应用有效
申请号: | 201610879330.1 | 申请日: | 2016-09-30 |
公开(公告)号: | CN106432512B | 公开(公告)日: | 2022-03-01 |
发明(设计)人: | 李军强;杨鸣鸣;莫清珊;雷二铭;邱琳;李曦;廖正芳;邵忠琦 | 申请(专利权)人: | 康希诺生物股份公司 |
主分类号: | C07K19/00 | 分类号: | C07K19/00;C12N15/62;C12N15/70;A61K39/102;A61K39/39;A61P31/04 |
代理公司: | 北京布瑞知识产权代理有限公司 11505 | 代理人: | 孟潭 |
地址: | 300457 天津市滨海新区经济技术开发*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | 本发明公开了一种增强多糖抗原免疫原性的蛋白载体及其制备方法与应用。由CRM197A基因序列和Hin47基因序列作为模板,通过over‑lap PCR扩增出融合基因;融合基因和pET 9a表达载体均经BamHI和NdeI双酶切后通过T4连接酶进行连接;通过酶切鉴定表明成功连接后,经IPTG诱导表达,经纯化获得CRM197A‑Hin47融合蛋白。通过CDAP/CNBr或者还原胺法将b型流感嗜血杆菌加膜多糖PRP和融合蛋白偶联,制备得到PRP与融合蛋白的结合物,可用于制备预防b型流感嗜血杆菌的结合疫苗。实验证明,将融合蛋白作为多糖结合疫苗的蛋白载体,可突出地增强多糖抗原的免疫原性,而且基于该蛋白载体开发的疫苗可以有效降低目前大量使用同种蛋白载体引起的免疫干扰,易于联合疫苗及多价疫苗的开发。 | ||
搜索关键词: | 一种 增强 多糖 抗原 免疫原性 蛋白 载体 及其 制备 方法 应用 | ||
【主权项】:
一种增强多糖抗原免疫原性的蛋白载体,其特征在于,所述蛋白载体为CRM197A‑Hin47融合蛋白,选自:(n)CRM197A‑linker‑(n)Hin47,(n)Hin47‑linker‑(n)CRM197A,(Hin47‑linker‑CRM197A)n,(CRM197A‑linker‑Hin47)n,其中,n为该单体基因的分子数,n=1、2或3,linker选自:G4S、DL或EL。
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