[发明专利]一种测定脂质囊泡中蛋白或多肽类药物包封率的方法

摘要

本发明涉及一种测定脂质囊泡中蛋白或多肽类药物包封率的方法，属于药物分析技术领域。本发明将制备好的包裹有蛋白或多肽的脂质囊泡溶液稀释，取稀释后的脂质囊泡溶液加入非离子表面活性剂进行破乳，再取破乳前后的脂质囊泡溶液，分别加入BCA反应液，在一定温度和时间下显色；并在562nm处读取吸光度，根据标准曲线计算蛋白浓度和包封率。该方法利用脂质囊泡外游离蛋白和脂质囊泡内包裹蛋白与显色剂反应速率的差异，测量脂质囊泡蛋白药物包封率，无需对游离蛋白进行分离，操作方便，重复性好，解决了常规方法在测量脂质囊泡蛋白药物包封率时的繁琐和偏差问题，为需要脂质囊泡蛋白药物的相关生产应用和研究领域提供了一项有效的方法依据。

主权项

一种测定脂质囊泡中蛋白或多肽类药物包封率的方法，其特征在于，利用脂质囊泡内外蛋白或多肽与显色试剂的反应速率差异实现包封率的计算，所述方法包括以下步骤：（1）常规制备包裹有蛋白或多肽的脂质囊泡；（2）将步骤（1）中的脂质囊泡中的总蛋白浓度稀释到合适范围内；（3）取一定量步骤（2）中的脂质囊泡溶液，加入破乳剂，使脂质囊泡溶解；（4）将步骤（2）和步骤（3）中的脂质囊泡溶液，分别加至96孔板，再在每孔中加入能与蛋白或多肽进行显色反应的试剂；（5）在步骤（4）中所述的96孔板的标准品孔中分别加入牛血清白蛋白标准品，再加入能与蛋白或多肽进行显色反应的试剂；（6）将步骤（5）的96孔板在一定温度下反应一段时间，直至出现颜色变化；（7）将步骤（6）的96孔板放置于酶标仪，读取吸光度值；计算各孔蛋白浓度；（8）根据各孔蛋白浓度计算包封率。