[发明专利]一种酸性条件下胶原蛋白海绵的制备方法

摘要

本发明公开了一种酸性条件下胶原蛋白海绵的制备方法，包括如下步骤将哺乳动物皮肤的真皮层、生石灰、水混合，室温下震荡；用洗脱液洗脱；冻干，破碎成颗粒；将颗粒与含胃蛋白酶的乙酸溶液混合，搅拌、离心，取上清；盐析沉淀胶原蛋白并纯化；再溶解于乙酸溶液中，调节pH至1‑5，注入模具中冷冻干燥，交联处理，包装、灭菌后得到胶原蛋白海绵产品。本发明通过两步法即可直接提取高纯度原材料，并在胶原蛋白海绵的制备过程中，摒弃对胶原蛋白溶液pH中性的硬性要求，摸索出在低pH的条件下，能制备出理想的胶原蛋白海绵，有效地简化了生产工艺、降低了制备成本。

主权项

一种酸性条件下胶原蛋白海绵的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤一、取新鲜哺乳动物皮肤的真皮层，洗涤、晾干；步骤二、将步骤一获得的真皮层、生石灰、水混合，在室温下震荡1‑2h；其中，生石灰和水的质量体积比为1‑5g:100ml，真皮层浸没溶液中；步骤三、从步骤二的溶液中取出真皮层，洗涤后浸没到洗脱液中，室温震荡24‑48h，期间多次换洗脱液；步骤四、从步骤三的洗脱液中取出真皮层，洗涤冻干后，破碎成颗粒；步骤五、将步骤四制备的颗粒与含0.1‑1mg/ml胃蛋白酶的0.1‑1mol/L乙酸溶液混合，37℃搅拌30‑48小时，离心，取上清液；其中，颗粒和乙酸溶液的质量体积比为1‑12mg:1mL；步骤六、往步骤五的上清液中加入NaCl至其终浓度为1‑3mol/L，在2‑6℃下静置12‑24小时，离心，弃上清，得到胶原蛋白；步骤七、将步骤六得到的胶原蛋白溶解于0.1‑1mol/L乙酸溶液中，置于透析袋透析去盐，将去盐的胶原蛋白溶液低温干燥后即获得精制胶原蛋白粉；步骤八、将步骤七制得的精制胶原蛋白粉溶解于0.1‑1mol/L乙酸溶液中，胶原蛋白粉和乙酸溶液的质量体积比为3‑12mg:1mL，调节pH至1‑5；将胶原蛋白溶液注入模具中，冷冻干燥，得到胶原蛋白海绵材料；步骤九、利用化学或物理交联法对胶原蛋白海绵进行交联处理；步骤十、将交联处理后的胶原蛋白海绵包装、灭菌得到胶原蛋白海绵产品。