[发明专利]一种富含AT或者GC基因的合成方法有效
| 申请号： | 201610707981.2 | 申请日： | 2016-08-23 |
| 公开（公告）号： | CN107760742B | 公开（公告）日： | 2022-10-11 |
| 发明（设计）人： | 黄小罗;翟春华;张丽华;李子龙;闵静;柳振宇 | 申请（专利权）人： | 南京金斯瑞生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12P19/34 | 分类号： | C12P19/34 |
| 代理公司： | 南京天华专利代理有限责任公司 32218 | 代理人： | 傅婷婷;夏平 |
| 地址： | 211100 江苏省南京*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种富含AT或者GC基因的合成方法。该方法包括：1)将基因的两条链分别分割成多个寡核苷酸片段，一条链寡核苷酸片段和对应的另外一条链寡核苷酸片段能够互补配对产生带有粘性末端的双链寡核苷酸片段；相邻两个双链寡核苷酸片段的相邻粘性末端能互补配对，且粘性末端长度依照基因的序列顺序，依次为4，6，…2(n+1)个碱基；2)合成寡核苷酸片段；3)将寡核苷酸链分段慢退火形成双链寡核苷酸片段；4)双链寡核苷酸片段磷酸化；5)将各双链寡核苷酸片段连接成完整的基因。该方法实现了富含AT或者GC基因的有效组装。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 富含 at 或者 gc 基因 合成 方法 | ||
【主权项】：
一种富含AT或者GC基因的合成方法，其特征在于包含以下步骤：步骤一：将基因的一条链分割成A1，A2…At的多个寡核苷酸片段；将基因的另一条链分割成B1,B2…Bt的多个寡核苷酸片段；An和对应的Bn寡核苷酸片段能够互补配对产生带有粘性末端的双链寡核苷酸片段，其中相邻两个双链寡核苷酸片段的相邻粘性末端能互补配对，且粘性末端长度依照基因的序列顺序，依次为4，6，8，10…2(n+1)个碱基；n选自1,2,3，……，t。步骤二:获得步骤一中的寡核苷酸片段；步骤三：分别将An，Bn的寡核苷酸链分段慢退火形成双链寡核苷酸片段；步骤四：将步骤三中所获得的双链寡核苷酸片段利用磷酸化酶进行磷酸化；步骤五：将步骤四中所获得的各个双链寡核苷酸片段利用连接酶，连接成一条完整的基因。
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