[发明专利]使用ATG‑F培养并获得肿瘤杀伤细胞的方法在审

专利信息
申请号: 201610613909.3 申请日: 2016-07-28
公开(公告)号: CN106222138A 公开(公告)日: 2016-12-14
发明(设计)人: 娄世锋;张宇尘 申请(专利权)人: 重庆医科大学附属第二医院
主分类号: C12N5/0783 分类号: C12N5/0783
代理公司: 重庆志合专利事务所50210 代理人: 胡荣珲
地址: 400010*** 国省代码: 重庆;85
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摘要: 发明涉及一种使用ATG‑F培养并获得肿瘤杀伤细胞的方法,该方法由抗人T细胞兔免疫球蛋白(ATG‑F)通过CD2途径激活并协同γ‑干扰素(INF‑γ)及白介素‑2(IL‑2)培养杀伤细胞,该方法与CD3单抗激活培养的杀伤细胞相比较,其NK细胞得到有效增殖,抗瘤活性更好,并且安全性好,可以推广应用于临床。
搜索关键词: 使用 atg 培养 获得 肿瘤 杀伤 细胞 方法
【主权项】:
一种使用ATG‑F培养并获得肿瘤杀伤细胞的方法,其特征在于,有以下步骤:1)单个核细胞的收集纯化取外周血白细胞,淋巴细胞分离液中离心分离,取单个核细胞层细胞,加入悬浮细胞培养液吹打分散,得到外周血单个核细胞; 2)细胞的培养取步骤1)得到的外周血单个核细胞用培养液稀释,添加IFN‑γ,在37℃、CO2 5%、饱和湿度中恒温培养;24小时后在细胞的培养液中加入IL‑2至终浓度 300IU‑1000IU/ml;添加抗人T细胞兔免疫球蛋白(ATG‑F)通过CD2途径激活免疫细胞,观察、确保细胞处于正常生长状态,每2‑3天补充一次含IL‑2的培养基,培养并监测细胞状态;3)总共持续培养10‑28天,得到ATG‑F激活的杀伤细胞。
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