[发明专利]一种载紫杉醇和/或载siRNA微泡，制备方法及其应用

摘要

本发明提供一种载紫杉醇和/或载siRNA微泡，载紫杉醇微泡为PLGA包裹紫杉醇微泡；载siRNA微泡为PLGA包裹siRNA微泡；载紫杉醇和siRNA微泡为PLGA包裹紫杉醇微泡与PLGA包裹siRNA微泡混合物。载紫杉醇和siRNA微泡为PLGA包裹紫杉醇微泡与PLGA包裹siRNA微泡的混合物。其制备方法包括载紫杉醇微泡的制备及载siRNA微泡的制备。本发明将其应用于制备抑制宫颈癌的药物上。实验表明超声介导载紫杉醇及载siRNA微泡对宫颈癌Caski细胞分别有一定的抑制作用，两者联合应用，其协同抑制宫颈癌Caski细胞增殖的效果更好。

主权项

1.一种载紫杉醇和载siRNA微泡，其特征在于，载紫杉醇和siRNA微泡为PLGA包裹紫杉醇微泡与PLGA包裹siRNA微泡混合物，包括如下步骤：（1）载紫杉醇微泡，取紫杉醇溶于聚乙二醇400作为内水相(W1)，聚乳酸羟基乙酸共聚物（PLGA）溶于二氯甲烷作为油水相(O)，配制质量浓度为0.2‑0.3g/ml 的聚乳酸羟基乙酸共聚物二氯甲烷溶液；混合内水相W1和油水相O得到初乳（W/O），配制质量浓度为 3‑8%聚乙烯水溶液作外水相(W2)，将外水相加入到初乳中，均质机以10000rpm的转速持续震荡搅拌3‑8min乳化形成复乳(W/O/W)，磁力搅拌机搅拌，离心，洗涤，真空冷冻干燥，灭菌，收集灭菌微泡粉末，即为载紫杉醇微泡；（2）载siRNA微泡，将实验所需的烧杯、离心管、玻璃棒以及灭菌后的物品放置于质量浓度为 0.1% 焦碳酸二乙酯（DEPC）溶液中浸泡24 h，以去除 RNA 酶；将DEPC水重悬siRNA，得到已溶解的siRNA溶液；称量聚乳酸羟基乙酸（PLGA）溶于二氯甲烷中，配制浓度为0.2‑0.3g/ml 的聚乳酸羟基乙酸（PLGA）二氯甲烷溶液；将已溶解的siRNA 溶液加入到混合好的二氯甲烷聚乳酸羟基乙酸 PLGA 溶液中，形成油水相，均质机以 10000rpm 的转速持续震荡搅拌 30‑40s，形成乳白色油包水乳液，配制质量浓度为 3‑8%的聚乙烯 PVA 水溶液，为外水相；将外水相加入到上述 siRNA与PLGA乳白色油包水乳液，形成复乳，均质机以10000rpm的转速持续震荡搅拌3‑8 min，磁力搅拌机搅拌，离心，洗涤，真空冷冻干燥，灭菌，收集灭菌微泡粉末，得到载siRNA微泡；（3）载紫杉醇和siRNA微泡，经步骤（1）中的载紫杉醇微泡与步骤（2）中的载 siRNA微泡混合得到。