[发明专利]一种靶向敲除FTO基因的sgRNA及CRISPR/Cas9慢病毒系统与应用有效
| 申请号： | 201610487032.8 | 申请日： | 2016-06-24 |
| 公开（公告）号： | CN106047877B | 公开（公告）日： | 2019-01-11 |
| 发明（设计）人： | 纪卫东;苏甲林;阙彪;张海青;王敏 | 申请（专利权）人： | 中山大学附属第一医院 |
| 主分类号： | C12N15/113 | 分类号： | C12N15/113;C12N15/867;C12N15/66;C12N5/10 |
| 代理公司： | 广州三辰专利事务所(普通合伙) 44227 | 代理人： | 范钦正 |
| 地址： | 510055 *** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种靶向敲除FTO基因的sgRNA及CRISPR/Cas9慢病毒系统与应用。该sgRNA选自DNA序列如下的FTOsgRNAsp2或FTOsgRNAsp3。该sgRNA对FTO基因的切割效率高。将含有该sgRNA的CRISPR/Cas9慢病毒系统转染SV‑HUC‑1，得到的细胞株FTO蛋白表达水平显著降低。因此，本发明提供的sgRNA能有效靶向敲除FTO基因，将其构建入CRISPR/Cas9慢病毒系统，该系统能敲除FTO基因，得到敲除FTO基因的细胞株，从而有利于研究细胞株中的FTO的作用机制。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 靶向 fto 基因 sgrna crispr cas9 病毒 系统 应用 | ||
【主权项】：
1.一种靶向敲除FTO基因的sgRNA，其特征在于：选自DNA序列如下的FTOsgRNAsp2或FTOsgRNAsp3：FTOsgRNAsp2的序列如下：FTOsgRNAsp2oligo1：5’‑caccgCCAATGAGGATGCGAGATAC‑3’；FTOsgRNAsp2oligo2：5’‑aaacGTATCTCGCATCCTCATTGGc‑3’；FTOsgRNAsp3的序列如下：FTOsgRNAsp3oligo1：5’‑caccgCCGGTATCTCGCATCCTCAT‑3’；FTOsgRNAsp3oligo2：5’‑aaacATGAGGATGCGAGATACCGGc‑3’。
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