[发明专利]一种vin-cdtb融合蛋白的制备方法有效
申请号: | 201610402221.0 | 申请日: | 2016-06-01 |
公开(公告)号: | CN106399344B | 公开(公告)日: | 2021-01-01 |
发明(设计)人: | 罗朝领;冯奇;杜庆辉;茅柳娟;马贵芳 | 申请(专利权)人: | 上海领潮生物新材料有限公司 |
主分类号: | C12N15/70 | 分类号: | C12N15/70;C12N1/21;C07K19/00;G01N33/68;C12R1/19 |
代理公司: | 上海宣宜专利代理事务所(普通合伙) 31288 | 代理人: | 刘洁瑜 |
地址: | 201600 上海市松江区*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明公开了一种vin‑cdtb融合蛋白的制备方法,其特征为,通过在大肠杆菌宿主细胞中进行含vin基因和cdtb基因在同一载体中串联表达的载体和工程菌的构建、诱导表达、纯化,制备重组vin‑cdtb融和蛋白。发明还提供了用于检测肠易激综合征(irritable bowel syndrome,IBS)的试剂盒。 | ||
搜索关键词: | 一种 vin cdtb 融合 蛋白 制备 方法 | ||
【主权项】:
vin基因和cdtb基因在同一载体中串联表达载体和工程菌的构建方法,包括如下步骤:1)通过DNA star软件对人粘着斑蛋白(vinculin)和空肠弯曲杆菌细胞扩张毒素B(cdtb)进行B细胞抗原表位分析。确定了vinculin 216‑918氨基酸序列和cdtb全长序列,通过linker把两者直接串联,并命名为vin‑cdtb,融和基因序列进行人工合成2)通过引物扩增融和基因序列,利用酶切位点插入到pET28a中,并命名为pET28‑vincdtb,进行测序;3)转化BL21(DE3),菌株命名为BL21‑VC。
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