[发明专利]犬弓形虫感染双抗夹心ELISA检测试剂盒及制备方法

摘要

本发明提供一种检测犬弓形虫循环抗原的双抗夹心ELISA试剂盒及其制备方法，利用两株抗弓形虫SAG3单抗，即一株42#抗弓形虫SAG3单抗和一株29#抗弓形虫SAG3单抗建立了检测犬弓形虫CAg的双抗体夹心ELISA方法。该检测特异性高、灵敏度较好、准确性高、稳定性好。具有操作简单、检测快速，易于判断等优点，适合于临床的快速诊断和基层等流行病学调查。

主权项

一种检测弓形虫循环抗原的双抗夹心ELISA试剂盒，其特征在于主要由以下部分组成：HRP酶标单抗、酶标物稀释液、聚苯乙烯塑料反应板、PBS(磷酸盐缓冲液)、包被液、封闭液、洗涤液、底物溶液、终止液及样品稀释液、犬弓形虫感染参照阳性及阴性血清；所述捕获抗体为42#抗弓形虫SAG3单克隆抗体（Anti‑A‑SAG3‑42）（效价为204800，亚型为G1）；检测抗体为HRP标记的29#抗弓形虫SAG3单克隆抗体（HRP‑Anti‑A‑SAG3‑29）（效价为204800，亚型为G2a）包被液是PH值为9.6的0.05M碳酸盐缓冲液；样品稀释液（PBS）及洗涤液（PBST）是含有0.5% Tween‑20的磷酸盐缓冲液；封闭液是10 %胎牛血清的PBST溶液；底物显色液是TMB底物溶液；终止液是2mol/L 的 H₂SO₄溶液 。