[发明专利]一种利用草酸青霉半连续发酵生产纤维素酶的方法

摘要

本发明公开了一种利用草酸青霉半连续发酵生产纤维素酶的方法，是将草酸青霉在以木糖渣为主要碳源的廉价培养基中发酵，当发酵液中滤纸酶活达到10IU/mL时放出部分发酵液到储料罐中，同时向发酵罐中补入与放出发酵液相同体积量的初始发酵培养基，在原条件下继续新一轮发酵；当发酵液中滤纸酶活再次达到10IU/mL时，再次放出部分发酵液，并向发酵罐中再补入与放出发酵液相同体积量的初始发酵培养基，在原条件下再进行新一轮发酵，如此重复进行半连续操作获得含纤维素酶的发酵液。本发明方法操作简便，生产成本低，可显著提高生产效率和设备利用率，纤维素酶最高容积生产效率可达158.38IU/L/h。

主权项

1.一种利用草酸青霉半连续发酵生产纤维素酶的方法，是将草酸青霉的种子液按体积百分比2～10％的接种量接入装有以木糖渣为主要碳源的廉价培养基的发酵罐中，以温度为25～35℃，搅拌转速为150～400rpm，通风比为0.4～1.2vvm的条件进行发酵培养，当测得发酵液中滤纸酶活达到10IU/mL时放出部分发酵液到储料罐中，同时向发酵罐中补入与放出发酵液相同体积量的初始发酵培养基，在原条件下继续新一轮发酵；当发酵液中滤纸酶活再次达到10IU/mL时，再次放出部分发酵液，同时再向发酵罐中补入与放出发酵液相同体积量的初始发酵培养基，在原条件下再进行新一轮发酵，如此重复进行半连续操作获得含纤维素酶发酵液；其特征在于：所述草酸青霉是草酸青霉(Penicillium oxalicum)Re‑10菌株，其保藏编号为CGMCC No.8922；所述以木糖渣为主要碳源的廉价培养基的组成为：木糖渣10～50g/L，微晶纤维素1～10g/L，麸皮20～100g/L，豆饼粉5～20g/L，硫酸铵1～5g/L，硝酸钠1～5g/L，尿素0.5～2g/L，磷酸二氢钾1～5g/L，硫酸镁0.2～1g/L，加蒸馏水定容到1L；所述当测得发酵液中滤纸酶活达到10IU/mL时对应的发酵时间为96～120h；所述放出部分发酵液的体积量是初始装液体积量的30～70％；所述新一轮发酵时，当发酵液中滤纸酶活再次达到10IU/mL时对应的发酵时间为12～48h；所述重复半连续发酵的轮次为1～10轮。