[发明专利]一种检测外周血中卵巢癌细胞标志物的试剂盒

摘要

本发明提供一种检测外周血中卵巢癌细胞标志物的试剂盒，包括结合有卵巢癌抗体的磁珠及相应缓冲试剂，该试剂盒采用磁珠分选，RT‑PCR等分子生物学的方法检测卵巢癌患者血液循环中的肿瘤细胞的生物学活性，确定药物治疗靶点的基因，通过检测EpCAM‑2、Muc1、Her2，Wt‑1、Pax8和P16的表达水平，确定卵巢癌的发展及转归，对卵巢癌的个性化治疗提供理论依据和实验证据。本发明提供的试剂盒检测样本量小，对患者伤害小，检测灵敏度高，检出率可达100％。

主权项

一种检测外周血中卵巢癌细胞标志物的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒由如下组分组成：结合有卵巢癌抗体的磁珠：结合有寡核苷酸Oligo(dT)的磁珠；缓冲液A 100‑200mL；缓冲液B 100‑200mL；裂解/结合缓冲液 150‑250mL；10×缓冲液 4.0‑5.0mL；dNTPs，5mM each 4.0‑5.0mL；逆转录酶，10000U/μL 2.0‑3.0mL；RNA酶抑制剂，40U/μL 0.4‑0.6mL；2×热启动PCR混合液 2‑3mL；RNase‑free水 1‑2mL；卵巢癌肿瘤标志物引物10μmol/L 3.0‑5.0mL；其中所述卵巢癌肿瘤标志物为EpCAM、Her2、Muc1、Pax8、wt‑1、P16中的一种或多种；所述EpCAM引物序列为：上游引物如SEQ ID NO：1所示；下游引物如SEQ ID NO：2所示；所述Her2引物序列为：上游引物如SEQ ID NO：3所示；下游引物如SEQ ID NO：4所示；所述Muc 1引物序列为：上游引物如SEQ ID NO：5所示；下游引物如SEQ ID NO：6所示；所述Pax8引物序列为：上游引物如SEQ ID NO：7所示；下游引物如SEQ ID NO：8所示；所述Wt‑1引物序列为：上游引物如SEQ ID NO：9所示；下游引物如SEQ ID NO：10所示；所述P16引物序列为：上游引物如SEQ ID NO：11所示；下游引物如SEQ ID NO：12所示；所述卵巢癌抗体为抗EpCAM单克隆抗体、抗MUC1单克隆抗体和抗HER‑2单克隆抗体。