[发明专利]一种低转苷酶背景的糖化酶高产菌基因敲除重组菌及其构建与应用有效
| 申请号： | 201610308960.3 | 申请日： | 2016-05-10 |
| 公开（公告）号： | CN105969675B | 公开（公告）日： | 2019-11-15 |
| 发明（设计）人： | 潘力;杨海燕;王斌 | 申请（专利权）人： | 华南理工大学 |
| 主分类号： | C12N1/15 | 分类号： | C12N1/15;C12N15/80;C12N15/65;C12N9/34;C12R1/685 |
| 代理公司： | 44245 广州市华学知识产权代理有限公司 | 代理人： | 罗观祥<国际申请>=<国际公布>=<进入 |
| 地址： | 510640广东*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种低转苷酶背景的糖化酶高产菌基因敲除重组菌及其构建与应用，属于生物技术领域。本发明的重组菌是通过失活α‑葡萄糖转苷酶表达相关的一个或多个基因后得到的。本发明的实验证明，本发明通过对一株高产糖化酶的黑曲霉pyrG缺陷型Aspergillus niger SH‑2:ΔpyrG进行基因工程改造，失活基因agdB、agdA和agdE后，得到低转苷酶活性的新菌株，利用该菌株发酵生产的糖化酶与原始菌株相比，糖化酶酶活增加33％，α‑葡萄糖转苷酶酶活降低43％以上，简化了从发酵液中去除转苷酶的分离纯化工艺，降低了生产成本，具有一定的创新性，有较强的开发意义。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 低转苷酶 背景 糖化酶 高产 基因 重组 及其 构建 应用 | ||
【主权项】：
1.一种低转苷酶背景的糖化酶高产菌基因敲除重组菌，其特征在于：是对高产糖化酶的黑曲霉进行基因工程改造获得的重组菌；所述基因工程改造为失活所述高产糖化酶的黑曲霉中agdB、agdA和agdE，或失活agdB、agdA、agdE和agdG；/n所述基因agdB的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示；所述基因agdA的核苷酸序列如SEQID NO:2所示；所述基因agdE的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示；所述基因agdG的核苷酸序列如SEQ ID NO:4所示；/n所述的高产糖化酶的黑曲霉为无孢黑曲霉SH-2经过敲除pyrG基因获得的pyrG缺陷型菌株，命名为黑曲霉SH-2:ΔpyrG。/n
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