[发明专利]嗜热糖化酶表达盒及其应用有效

专利信息
申请号: 200910077645.4 申请日: 2009-02-10
公开(公告)号: CN101538577A 公开(公告)日: 2009-09-23
发明(设计)人: 汪兵;王小娟;杨建国 申请(专利权)人: 北京中天诺亚体育科技有限公司
主分类号: C12N15/56 分类号: C12N15/56;C12N15/63;C12N15/74;C12N9/34;C12R1/685
代理公司: 北京纪凯知识产权代理有限公司 代理人: 关 畅;任凤华
地址: 100049北京市海淀*** 国省代码: 北京;11
权利要求书: 查看更多 说明书: 查看更多
摘要: 发明公开了一种嗜热糖化酶表达盒及其应用。本发明所提供的嗜热糖化酶表达盒,依次含有黑曲霉糖化酶基因5′侧翼区、嗜热糖化酶基因、黑曲霉糖化酶基因3′侧翼区、启动子、筛选标记基因、终止子和所述黑曲霉糖化酶基因3′侧翼区;所述黑曲霉糖化酶基因5′侧翼区选自黑曲霉糖化酶基因5’端至少1500的DNA片段;所述黑曲霉糖化酶基因3′侧翼区选自黑曲霉糖化酶基因3’端至少1500的DNA片段;所述黑曲霉糖化酶基因5′侧翼区含有黑曲霉糖化酶基因启动子。本发明的嗜热糖化酶表达载体导入黑曲霉中可生产嗜热糖化酶。
搜索关键词: 糖化酶 表达 及其 应用
【主权项】:
1、嗜热糖化酶表达盒,自上游至下游依次含有黑曲霉糖化酶基因5′侧翼区、嗜热糖化酶基因、黑曲霉糖化酶基因3′侧翼区、启动子、筛选标记基因、终止子和所述黑曲霉糖化酶基因3′侧翼区;所述黑曲霉糖化酶基因5′侧翼区选自黑曲霉糖化酶基因5’端至少1500bp的DNA片段;所述黑曲霉糖化酶基因3′侧翼区选自黑曲霉糖化酶基因3’端至少1500bp的DNA片段;所述黑曲霉糖化酶基因5′侧翼区含有黑曲霉糖化酶基因启动子。
下载完整专利技术内容需要扣除积分,VIP会员可以免费下载。

该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息,商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于北京中天诺亚体育科技有限公司,未经北京中天诺亚体育科技有限公司许可,擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作,请联系【客服

本文链接:http://www.vipzhuanli.com/patent/200910077645.4/,转载请声明来源钻瓜专利网。

同类专利
  • 具有糖化功能的基因工程酵母及其制法和应用-201510083082.5
  • 杨晟 - 安琪酵母股份有限公司
  • 2015-02-15 - 2019-11-12 - C12N15/56
  • 本发明公开了一种具有糖化功能的基因工程酵母及其制法和应用。本发明还公开了一种编码葡萄糖淀粉酶的核苷酸序列,为(a)所述的核苷酸序列的编码SEQ ID NO:16所示的氨基酸序列;或(b)所述的核苷酸序列的葡萄糖淀粉酶编码区的序列与SEQ ID NO:15所示核苷酸序列具有≥80%相同性。本发明的基因工程酵母,基因组中整合有该核苷酸序列的葡萄糖淀粉酶编码区的序列,为具有高效糖化功能的酿酒酵母,在不额外添加糖化酶进行酒精发酵时,可获得高产量的乙醇。
  • 一种三疣梭子蟹几丁质酶基因及其重组表达蛋白和应用-201910135567.2
  • 吕建建;宋柳;刘萍;李健 - 中国水产科学研究院黄海水产研究所
  • 2019-02-20 - 2019-11-08 - C12N15/56
  • 本发明公开了一种三疣梭子蟹几丁质酶基因及其重组表达蛋白和应用。本发明通过进行三疣梭子蟹几丁质酶PtCht4基因克隆,利用PtCht4基因编码蛋白的核苷酸序列构建原核表达载体,筛选出一种能够高效表达三疣梭子蟹PtCht4基因重组蛋白的表达体系,通过蛋白纯化与复性获得能够正确折叠且具有活性的重组蛋白。本发明将重组蛋白用于体外抑菌,由于PtCht4基因属于三疣梭子蟹的内源基因,由此表达产出的蛋白制成的药物使机体不会产生排斥反应,且能够激发机体的非特异性免疫系统,降低细菌的耐药性,体外抑菌技术的实现可为蟹类新型药物的研究提供一种新的思路。
  • 木聚糖酶、编码它们的核酸以及其制备和应用方法-201310541109.1
  • K·A·加里;R·德尔梅尔 - 维莱尼姆公司
  • 2008-08-01 - 2019-10-01 - C12N15/56
  • 本发明涉及具有木聚糖酶、甘露聚糖酶和/或葡聚糖酶活性的酶,其例如催化内部β‑1,4‑木糖苷键或内β‑1,4‑葡聚糖键的水解;和/或将线性多糖β‑1,4‑木聚糖降解成木糖。因此,本发明提供分解作为植物细胞壁主要成分的半纤维素的方法和过程,包括水解任何植物或木材或木制品、废木料、纸浆、纸制品或废纸或纸副产品中的半纤维素的方法和过程。另外,还提供设计新木聚糖酶、甘露聚糖酶和/或葡聚糖酶的方法和其应用方法。所述木聚糖酶、甘露聚糖酶和/或葡聚糖酶在增加的pH和温度下具有增加的活性和稳定性。
  • 几丁质酶基因chiC及其编码蛋白和应用-201510219342.7
  • 王晓辉;张庆芳;迟乃玉 - 大连大学
  • 2015-04-30 - 2019-09-24 - C12N15/56
  • 本发明涉及几丁质酶基因chiC及其编码蛋白和应用,属于基因工程技术领域。本发明以假交替单胞菌(Pseudoalteromonas sp.DL‑6)为研究对象,首次克隆出具有SEQ ID No.1所示核苷酸序列的几丁质酶基因chiC,并获得了高活性几丁质酶,其制备方法简单,生产成本低,产品易保存,适宜的酶解温度是30℃,酶解pH值为9.0,对胶体几丁质具有高降解活性可达1.569±0.017U/ml,几丁质酶chiC降解α几丁质和β几丁质生成几丁二糖,具有工业化生产前景。
  • 一种麦芽糖淀粉酶及其基因、含有该基因的工程菌及其应用-201610158814.7
  • 崔中利;周杰;李周坤;吴佳乐;黄彦 - 南京农业大学
  • 2016-03-18 - 2019-09-24 - C12N15/56
  • 本发明公开了一种麦芽糖淀粉酶及其基因、含有该基因的工程菌及其应用。本发明提供了一种产超高纯度麦芽糖的麦芽糖淀粉酶基因,其核苷酸序列为:SEQ ID NO.1所编码的麦芽糖淀粉酶氨基酸序列为:SEQ ID NO.2。利用该基因构建的毕赤酵母工程菌株能高效表达麦芽糖淀粉酶,该麦芽糖淀粉酶能高效的水解淀粉产生超高纯度麦芽糖,麦芽糖含量达90%以上,且水解终产物中不含葡萄糖。该酶以可溶性淀粉为底物时其比活力高达980U/mg。利用基因生产的酶制剂可用于食品、冷冻食品、烘焙、酿造、饮料工业和医药等行业,在解决实际问题的同时还可以取得可观的经济效益。
  • 聚半乳糖醛酸酶优化基因及其表达载体和应用-201610319841.8
  • 张宇宏;王姣姣;张伟;刘波;徐欣欣 - 中国农业科学院生物技术研究所
  • 2016-05-13 - 2019-09-24 - C12N15/56
  • 本发明公开了聚半乳糖醛酸酶优化基因及其表达载体和应用。本发明首先在不改变聚半乳糖醛酸酶氨基酸序列的前提下,综合考虑密码子偏好性,GC含量的变化,密码子适应指数(CAI),不稳定序列的删除,mRNA二级结构等因素,对聚半乳糖醛酸酶基因进行多种策略的改造,得到3个聚半乳糖醛酸酶优化基因。进一步将上述3个聚半乳糖醛酸酶基因和1个野生型基因转入到毕赤酵母中进行表达,最终筛选出分泌表达量显著提高、酶活力最强的核苷酸序列为SEQ ID NO.3所示的聚半乳糖醛酸酶优化基因。本发明聚半乳糖醛酸酶优化基因所表达的聚半乳糖醛酸酶能有效地降解梨汁中的果胶类物质,提高出汁率和光穿透率,为工业化扩大生产奠定了基础。
  • 一种海藻糖酶基因Bx-tre2及其应用-201910611165.5
  • 王峰;陈俏丽;王佳楠;李丹蕾 - 东北林业大学
  • 2019-07-08 - 2019-09-20 - C12N15/56
  • 一种海藻糖酶基因Bx‑tre2及其应用,它涉及一种海藻糖酶基因Bx‑tre2及其应用。本发明的目的是为了解决松材线虫抗逆态幼虫可在多种不良环境包括低温胁迫下长期存活,从而导致松材线虫蔓延的问题,海藻糖酶基因Bx‑tre2的核苷酸序列如序列表Seq ID No:1所示,本发明应用在松树病虫害防治上。本发明的海藻糖酶基因在松材线虫抗逆态幼虫受低温胁迫时表达量显著下降,表明该基因在松材线虫抗逆态幼虫抗低温胁迫中起到负调控作用。通过氟化钠诱导该基因过表达,可实现利用低温条件防治该线虫,从而有效阻止该线虫继续北侵。本发明应用于松材线虫防治领域。
  • 内切葡聚糖酶基因及其编码蛋白-201710626659.1
  • 林峻 - 福州大学
  • 2017-07-28 - 2019-09-10 - C12N15/56
  • 本发明公开了一种内切葡聚糖酶基因及其编码蛋白,所述内切葡聚糖酶基因的核酸序列如SEQ ID NO.1所示,该内切葡聚糖酶基因的编码蛋白具有如SEQ ID NO.2所示的蛋白序列。本发明内切葡聚糖酶基因编码的内切葡聚糖酶兼具良好的耐热性和抗冻融性,能够广泛应用于化妆品、食品、医药学、环境保护等领域。
  • 一种来源于类芽孢杆菌新型普鲁兰酶及其基因与应用-201910390539.5
  • 崔堂兵;苏红玉 - 华南理工大学
  • 2019-05-10 - 2019-08-27 - C12N15/56
  • 本发明公开了一种来源于类芽孢杆菌的新型普鲁兰酶及其编码基因与应用。所述来源于类芽孢杆菌的新型普鲁兰酶,其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。所述新型普鲁兰酶的编码基因pulA,核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。该普鲁兰酶为І型普鲁兰酶,能够在Escherichia coli BL21(DE3)中进行异源表达。该重组普鲁兰酶的分子量约为76.95 ku,比酶活达508.8 U/mg。本发明提供的来源于类芽孢杆菌的新型普鲁兰酶,可应用于淀粉加工、医药、化工、食品等相关行业。
  • 一种提高α-L-鼠李糖苷酶r-Rha1热稳定性的方法-201610635941.1
  • 李利君;吴喆瑜;倪辉;杨远帆;于越;朱艳冰;姜泽东;肖安风 - 集美大学
  • 2016-08-05 - 2019-08-13 - C12N15/56
  • 本发明公开了一种提高α‑L‑鼠李糖苷酶r‑Rha1热稳定性的方法。以原始型α‑L‑鼠李糖苷酶r‑Rha1(WT)基因为模板,采用易错PCR方法进行随机突变,构建该酶的突变文库,并建立了96孔板诱导表达及高通量筛选方法,最终获得了热稳定性提高的突变体。V529A突变体对试验使用的金属离子及效应物都具有与WT同样的耐受性。该突变体V529A具有优良的酶学性质,同时本发明也成功地构建了含上述突变体V529A的重组载体,实现了异源表达,为该酶的工业化生产和应用提供了良好的基础。
  • 一种来源于食木天牛的功能基因及其表达产物和应用-201610998231.5
  • 夏定国;梅慧珍;赵巧玲 - 江苏科技大学
  • 2016-11-14 - 2019-08-02 - C12N15/56
  • 本发明公开了一种来源于食木天牛的功能基因及其表达产物和应用,所述基因的核苷酸序列为SEQ ID NO:1,及由该基因编码的多功能纤维素酶,氨基酸序列为SEQ ID NO:2。本发明利用RACE方法从云斑天牛中克隆出编码多功能纤维素酶的基因,经系统发育分析表明,由昆虫内源性的GHF5纤维素酶组成的真核生物组区别于原核的GHF5纤维素酶组或线虫GH5纤维素酶组,且相对于其他家族,该酶能够消化坚韧的新鲜的木质纤维素;且其同时具有内切葡聚糖酶、外切葡聚糖酶和β‑葡聚糖苷酶的活性,单位酶活力为816U/mg;本发明所述多功能纤维素酶能够利用新鲜的植物或秸秆为原料合成生物能源,即能够高效分解木质生物质生产葡萄糖,进而为生物乙醇的合成提供原料。
  • 高效表达分泌β-甘露聚糖酶的重组枯草芽孢杆菌菌株及其获得方法-201810012118.4
  • 张大伟;付刚;宋亚凤 - 中国科学院天津工业生物技术研究所
  • 2018-01-05 - 2019-07-12 - C12N15/56
  • 本发明属于分子生物学技术领域,具体涉及一种高效表达分泌β‑甘露聚糖酶的重组枯草芽孢杆菌菌株及其获得方法。具体是首先将经过密码子优化的β‑甘露聚糖酶基因克隆中pMA5载体中不同的信号肽序列下游,使其分泌到胞外;其次在宿主菌基因组上过表达分泌过程中涉及的限制因子;最后更换其表达载体上启动子,通过增强转录和翻译过程从而在蛋白质合成水平增加β‑甘露聚糖酶的生成。本发明中高效表达分泌β‑甘露聚糖酶的重组枯草芽孢杆菌利用2×SR培养基在37℃,220rpm条件下发酵生产甘露聚糖酶,72h发酵液中β‑甘露聚糖酶的酶活力最高可达2207U/mL,为具有良好应用前景的菌株。
  • 一种木聚糖酶TlXynA的突变基因TlXynA_2及其应用-201610498150.9
  • 王禄山;刘诗佳;吴秀芸;张怀强 - 山东大学
  • 2016-06-29 - 2019-07-12 - C12N15/56
  • 本发明公开了一种木聚糖酶TlXynA的突变基因TlXynA_2,所述基因的突变位点为R116Q、R161Q和R187S,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明还公开了所述基因在制备木聚糖酶中的应用。实验证明,这种基因所编码的突变木聚糖酶活性可达到3623IU/mg,是野生型酶的99.7%;在外加盐浓度为5M时,其相对酶活性是野生型酶的1.50倍。预示该突变木聚糖酶具有耐高温、耐盐的特性,在饲料、食品、造纸、医药、能源等工业生产中具有广阔的应用前景。
  • 一种木聚糖酶TlXynA的突变基因TlXynA_1及其应用-201610498168.9
  • 王禄山;刘诗佳;吴秀芸;张怀强 - 山东大学
  • 2016-06-29 - 2019-07-12 - C12N15/56
  • 本发明公开了一种木聚糖酶TlXynA的突变基因TlXynA_1,所述基因的突变位点为R116Q和R161Q,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明还公开了所述基因在制备木聚糖酶中的应用。实验证明,这种基因所编码的突变木聚糖酶活性可达到4576IU/mg,比野生型酶提高了26%;在外加盐浓度为5M时相对酶活性是野生型酶的1.60倍;在pH为4时相对酶活性是野生型酶的1.27倍。预示该突变木聚糖酶具有耐高温、耐盐的特性,在饲料、食品、造纸、医药、能源等工业生产中具有广阔的应用前景。
  • 一种木聚糖酶AnXynB的突变基因AnXynB_1及其应用-201610498183.3
  • 王禄山;吴秀芸;刘诗佳;田震楠;张群;张怀强 - 山东大学
  • 2016-06-29 - 2019-07-12 - C12N15/56
  • 本发明公开了一种木聚糖酶AnXynB的突变基因AnXynB_1,所述基因的突变位点为S41N和T43E,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明还公开了所述基因在制备木聚糖酶中的应用。实验证明,这种基因所编码的突变木聚糖酶活性可达到6030.43IU/mg,比野生型酶提高了82%;在温度60℃下处理120min后仍然可以保持35.386%的酶活,然而野生型酶在相同处理条件下只能够保持6.988%的酶活。预示该突变木聚糖酶具有高活性、耐高温的特性,在饲料、食品、造纸、医药、能源等工业生产中具有广阔的应用前景。
  • 一种木聚糖酶TlXynA的突变基因TlXynA_3及其应用-201610497299.5
  • 王禄山;刘诗佳;吴秀芸;张怀强 - 山东大学
  • 2016-06-29 - 2019-07-12 - C12N15/56
  • 本发明公开了一种木聚糖酶TlXynA的突变基因TlXynA_3,所述基因的突变位点为R116Q、R161Q、R187S和K119T,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明还公开了所述基因在制备木聚糖酶中的应用。实验证明,这种基因所编码的突变木聚糖酶活性可达到3897IU/mg,是野生型酶的107%;在外加盐浓度为4M时相对酶活性是野生型酶的1.92倍。预示该突变木聚糖酶具有耐高温、耐盐的特性,在饲料、食品、造纸、医药、能源等工业生产中具有广阔的应用前景。
  • 一种β-1;6-葡聚糖酶及其编码基因和应用-201510816987.9
  • 崔中利;李周坤;张碧滢;叶现丰;黄彦 - 南京农业大学
  • 2015-11-23 - 2019-06-14 - C12N15/56
  • 本发明公开了一种新的β‑1,6‑葡聚糖酶及其编码基因和应用。本发明提供了新型的属于糖苷水解酶系的β‑1,6‑葡聚糖酶基因,其核苷酸序列为:SEQ ID NO.1,所编码的外膜型糖苷水解酶蛋白质氨基酸序列为:SEQ ID NO.2。该β‑1,6‑葡聚糖酶可以有效防止植物病原真菌对植物的侵染。利用该基因构建的工程菌株实现了β‑1,6‑葡聚糖酶基因的原核表达,并对其糖苷水解酶功能进行了验证,结果显示GluM可以有效地抑制稻瘟孢子的萌发,并能将稻瘟孢子分解。将β‑1,6‑葡聚糖酶基因转入到双子叶植物的模式物种拟南芥和单子叶植物的模式物种水稻中,得到的转基因植株分别显示出对灰霉和稻瘟具有较好的抗侵染效果。
  • 一种异淀粉酶及其基因、含有该基因的工程菌及其应用-201610368731.0
  • 崔中利;李周坤;冀凯;黄彦 - 南京农业大学
  • 2016-05-30 - 2019-06-14 - C12N15/56
  • 本发明属于应用工业微生物领域,公开了一种异淀粉酶及其基因、含有该基因的工程菌及其应用。本发明提供了淀粉水解酶系中关键酶之一的异淀粉酶基因,该基因全长为2436bp,G+C含量为66%,编码811个氨基酸,其核苷酸序列为:SEQ ID NO.1所编码的内切酶蛋白质氨基酸序列为:SEQ ID NO.2。利用该基因构建的工程菌株能高效表达异淀粉酶,该酶以土豆淀粉为测活底物,通过碘液检测异淀粉酶的活性,其比活力高达70600U/mg。利用基因生产的酶制剂可用于粮食加工、食品工业、酿造、发酵、纺织工业和医药等工业,在解决实际问题的同时还可以取得可观的经济效益。
  • 一种毕赤酵母中异源表达外切葡聚糖酶Cel6A;Cel7A的构建方法-201910235078.4
  • 钟成;舒月力;李栋梁 - 天津科技大学
  • 2019-03-26 - 2019-05-24 - C12N15/56
  • 本发明的目的在于构建一种异源表达外切葡聚糖酶Cel6A,Cel7A重组毕赤酵母,具体步骤如:(1)里氏木霉RNA和CDNA的获得:固体诱导培养基获得菌丝体,试剂盒提取总RNA和cDNA;(2)目的基因的克隆:用合理引物PCR扩增出目的基因;(3)构建表达载体:以Ppic9k为载体,将目的基因插入启动子AOX1下游,5'和3'端酶切位点分别为EcoRⅠ,NotⅠ;(4)获取重组菌株:以SalⅠ为线性化位点,实现表达载体线性化,电转,得到重组酵母;(5)重组菌株的诱导产酶:摇瓶发酵,用适当甲醇诱导产酶;(6)重组蛋白活性检测:利用SDS‑PAGE及刚果红‑CMC检测重组蛋白的表达量及活性。本方法构建的重组菌株能高效表达带his标签的蛋白,能得到高效单酶组分。
  • 菊花几丁质酶CmCHI基因及其应用-201610804141.8
  • 袁秀云;梁芳;宋彩霞;王莹博;魏颖坤;刘建松 - 郑州师范学院
  • 2016-09-06 - 2019-05-21 - C12N15/56
  • 本发明属于转基因工程技术领域,具体涉及菊花几丁质酶CmCHI基因及其在抗低温及抗真菌活性方面的潜在应用的专利申请。该基因包含1385个碱基,具体序列如SEQ ID NO.1所示。该基因所编码的菊花几丁质酶,包括319个氨基酸,属第19家族糖苷水解酶,具有溶菌酶活性。该基因在低温胁迫或白粉病的诱导下,基因表达量明显升高。本发明克隆获得了菊花几丁质酶基因全长序列,并进一步对该基因所编码的菊花几丁质酶的表达特性进行了初步研究。结合实时荧光定量PCR检测技术的应用,结果表明,在受低温胁迫或白粉病诱导时,菊花几丁质酶CmCHI基因的表达量均有明显提升,可用于培育获得具有一定抗性的菊花植株新品种。
  • 高效几丁质酶突变体的制备方法及应用-201610910629.9
  • 杨青;刘田;王迪;陈磊;卜云飞 - 大连理工大学
  • 2016-10-19 - 2019-05-21 - C12N15/56
  • 本发明公开一种高效几丁质酶突变体的制备方法及应用,首先涉及一种编码几丁质酶突变体的基因和与之对应的几丁质酶突变体,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。SmChiA(F232W/F396W)是将野生型SmChiA的第232和第396两个位置上的苯丙氨酸突变成色氨酸后获得的,通过对活性位点两个关键残基的增益突变所获得的几丁质酶突变体无论是对底物的结合能力还是对复杂底物的水解能力都有相应的增强。
  • 一种比酶活提高的木聚糖酶突变体及其编码基因与应用-201610570895.1
  • 张桂敏;卢毅宏;王钦宏;周玉玲;马延和 - 湖北大学
  • 2016-07-19 - 2019-05-10 - C12N15/56
  • 本发明涉及一种比酶活提高的木聚糖酶突变体及其编码基因与应用。木聚糖酶突变体,包括(a)、(b)或(c)所示的蛋白质;(a)SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列组成的蛋白质;(b)将SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代、缺失和/或添加且具有木聚糖酶活性的由(a)衍生的蛋白质;(c)编码(a)的核苷酸序列和编码(b)的核苷酸序列经分子杂交后编码出的并且具有木聚糖酶活性氨基酸序列组成的蛋白质。本发明所述的木聚糖酶突变体比酶活提高了2.8倍,可以用于降解木聚糖底物,具有作用温度和pH范围广,具有良好的耐酸耐碱性条件能力等优点。
  • 土曲霉CCF 3059 α-L-鼠李糖苷酶突变体及其应用-201610945270.9
  • 赵林果;葛林;石学佳;裴建军;吴涛;陈安娜 - 南京林业大学
  • 2016-10-26 - 2019-05-07 - C12N15/56
  • 土曲霉CCF 3059 α‑L‑鼠李糖苷酶突变体及其应用,包括如SEQ ID NO:2所示的D594Q基因、SEQ ID NO:3所示的D594R基因、SEQ ID NO:4所示的D594C基因、SEQ ID NO:5所示的G827K基因、SEQ ID NO:6所示的G827M基因和SEQ ID NO:7所示的G828A基因。突变酶MRha‑D594Q最适温度和原酶MRha均为65℃;但与原酶MRha相比,突变酶MRha‑D594Q在70℃和75℃时仍保持较高的酶活性;添加山梨醇能够进一步提高突变酶MRha‑D594Q的热稳定性,在70℃的半衰期提高了7.8倍。
  • 海洋微生物节杆菌YJ34产右旋糖酐酶基因及其重组工程菌-201910108956.6
  • 王淑军;刘红飞;任伟;吕明生;房耀维;刘姝 - 淮海工学院
  • 2019-02-03 - 2019-04-26 - C12N15/56
  • 本发明是一种海洋微生物节杆菌(Arthrobacter sp.)YJ34产右旋糖酐酶基因,该酶基因序列全长1923bp,以ATG为起始密码子,以TAG为终止密码子,GC碱基含量为59.23%。本发明还公开了前述右旋糖酐酶基因克隆及在大肠杆菌的高效表达得到的右旋糖酐酶基因重组工程菌。本发明属于酶学与酶工程技术领域,通过基因克隆与测序,构建重组工程菌,诱导表达,重组酶的纯化,获得纯化的重组酶。大大地提高了酶活力和酶稳定性。通过酶学性质测定该酶最适反应温度为55℃,最适作用pH为7.5。
  • 以海洋细菌为来源获取的κ-卡拉胶酶基因及重组酶制备方法-201610503827.3
  • 姚子昂;吴海歌;赵博闻;崔红利 - 大连大学
  • 2016-06-30 - 2019-04-26 - C12N15/56
  • 本发明涉及分子生物学和基因工程领域,具体来讲涉及一种以海洋细菌为来源编码获取Κ‑卡拉胶酶基因的及重组酶制备方法。本发明包括如下步骤:一、PCR法获得海洋细菌中κ‑卡拉胶酶基因的全长序列;二、以海洋细菌为来源基因κ‑卡拉胶酶基因的重组表达质粒和重组菌株的构建;三、利用重组表达菌株表达重组κ‑卡拉胶酶;四、重组酶的活性检测。本发明通过一种新的、高效、准确的途径,以海洋细菌为来源获得的κ‑卡拉胶酶基因应用于大肠杆菌工程菌株的构建,并实现具有活性重组酶的异源表达,为实现工业化生产卡拉胶酶提供基础;通过本发明中的以海洋细菌为来源获得的κ‑卡拉胶酶基因,与已知κ‑卡拉胶酶序列相似性最高为44%。
  • 一种超深渊来源溶菌酶及其制备方法-201811589246.1
  • 阮灵伟;施泓;李雪雪 - 国家海洋局第三海洋研究所
  • 2018-12-25 - 2019-04-16 - C12N15/56
  • 一种超深渊来源溶菌酶及其制备方法,涉及Eurythenes gryllus溶菌酶基因的核苷酸序列以及其所编码的氨基酸序列。通过提取Eurythenes gryllus总RNA,经RT‑PCR反转录为cDNA,通过PCR扩增获得了编码溶菌酶基因的核苷酸序列,并鉴定了溶菌酶基因EgLyz。在pET‑His载体构建了适用于原核表达的重组质粒,在大肠杆菌BL21中进行重组蛋白表达,经纯化后的蛋白纯度高,为后续生物活性分析奠定了坚实的基础。通过同源重组表达的溶菌酶,可以克服原料来源难以获取,分离纯化过程复杂繁琐、产量低等不足,为该蛋白能广泛应用于医药、食品和饲料行业等领域奠定基础。
专利分类
×

专利文献下载

说明:

1、专利原文基于中国国家知识产权局专利说明书;

2、支持发明专利 、实用新型专利、外观设计专利(升级中);

3、专利数据每周两次同步更新,支持Adobe PDF格式;

4、内容包括专利技术的结构示意图流程工艺图技术构造图

5、已全新升级为极速版,下载速度显著提升!欢迎使用!

请您登陆后,进行下载,点击【登陆】 【注册】

关于我们 寻求报道 投稿须知 广告合作 版权声明 网站地图 友情链接 企业标识 联系我们

钻瓜专利网在线咨询

400-8765-105周一至周五 9:00-18:00

咨询在线客服咨询在线客服
tel code back_top