[发明专利]一种酶法制备D-塔格糖的方法有效
| 申请号： | 201610299412.9 | 申请日： | 2016-05-06 |
| 公开（公告）号： | CN105734092B | 公开（公告）日： | 2019-07-16 |
| 发明（设计）人： | 严明 | 申请（专利权）人： | 江苏中酶生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12P19/02 | 分类号： | C12P19/02;C12N15/70;C12N15/53 |
| 代理公司： | 北京东方灵盾知识产权代理有限公司 11506 | 代理人： | 苏向银;熊剑 |
| 地址： | 224000 江苏省盐城市城*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种酶法制备D‑塔格糖的方法，包括1)单独构建含有半乳糖醇脱氢酶基因的工程菌以及含有NADH氧化酶基因的工程菌或者构建含有半乳糖醇脱氢酶基因与NADH氧化酶基因共表达的工程菌；2)将构建的工程菌进行发酵获得含有半乳糖醇脱氢酶、NADH氧化酶的整细胞；3)以含有半乳糖醇脱氢酶、NADH氧化酶的整细胞或半乳糖醇脱氢酶、NADH氧化酶的游离酶为催化剂，在弱碱性条件下，NAD+作为氢受体，催化半乳糖醇制备D‑塔格糖。本发明与传统依赖L‑阿拉伯糖异构酶的生产方法相比，其对底物的转化率高(>99.0％)、产物分离容易，并且本发明的方法中所使用的辅酶循环系统辅产物为水，对主产物分离纯化无影响。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 法制 塔格糖 方法 | ||
【主权项】：
1.一种酶法制备D‑塔格糖的方法，其特征在于包括下列步骤：(1)单独构建含有半乳糖醇脱氢酶基因的工程菌以及含有NADH氧化酶基因的工程菌或者构建含有半乳糖醇脱氢酶基因与NADH氧化酶基因共表达的工程菌；(2)将上述构建的工程菌进行发酵获得含有半乳糖醇脱氢酶、NADH氧化酶的整细胞；(3)以含有半乳糖醇脱氢酶、NADH氧化酶的整细胞或半乳糖醇脱氢酶、NADH氧化酶的游离酶为催化剂，在弱碱性条件下，NAD+作为氢受体，催化半乳糖醇制备D‑塔格糖；步骤(3)中催化反应体系是1.5～150g/L的半乳糖醇、50U～5KU的半乳糖醇脱氢酶、70U～8KU的NADH氧化酶和0.05～0.2mmol/L的NAD+，在pH7.5～9.0、反应温度45～55℃、搅拌转速180～280rpm以及通气量1～3VVM条件下反应1～24h，得到D‑塔格糖转化液。
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