[发明专利]一种大鼠肝星状细胞分离方法在审
申请号: | 201610298584.4 | 申请日: | 2016-05-03 |
公开(公告)号: | CN107338215A | 公开(公告)日: | 2017-11-10 |
发明(设计)人: | 张清;张亚洲;蒋敏;齐来俊 | 申请(专利权)人: | 江苏齐氏生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N5/071 | 分类号: | C12N5/071 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 214434 江苏省江阴市东盛*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明提供一种大鼠肝星状细胞分离方法,包括步骤(a)腹腔注射10%水合氯醛麻醉大鼠,U型剖开大鼠腹腔以暴露肝脏及门静脉;(b)静脉注射肝素,预热灌流液灌注肝脏;(d)取充分灌注后的肝脏,剪碎后于预热消化液中震荡消化;(e)消化后的肝组织经多层筛网过滤,低速离心吸取上清,再次离心获得细胞沉淀,清洗液清洗一次;(f)将获得的细胞沉淀重悬,经Nycoden梯度离心分离;(g)细胞清洗数次,完全培养基重悬细胞沉淀,接种培养;(h)细胞免疫荧光鉴定大鼠肝星状细胞。本发明提供的大鼠肝星状细胞分离方法可获得产量高、纯度高、活性高且能被激活的大鼠肝星状细胞。 | ||
搜索关键词: | 一种 大鼠 星状 细胞 分离 方法 | ||
【主权项】:
一种大鼠肝星状细胞分离及培养方法,其特征在于,包括步骤:(a)腹腔注射10%水合氯醛麻醉大鼠,于大鼠腹腔开口以暴露肝脏及门静脉;(b)静脉注射肝素,预热灌流液灌注肝脏;(d)取充分灌注后的肝脏,剪碎后于预热消化液中震荡消化;(e)消化后的肝组织经筛网过滤,低速离心吸取上清,再次离心获得细胞沉淀,清洗液清洗一次;(f)将获得的细胞沉淀重悬,经Nycoden分离纯化;(g)细胞清洗数次,完全培养基重悬细胞沉淀,接种培养;(h)细胞免疫荧光鉴定大鼠肝星状细胞。
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