[发明专利]基于轻同位素近同重标记的整体蛋白质定量分析方法有效
| 申请号： | 201610235638.2 | 申请日： | 2016-04-15 |
| 公开（公告）号： | CN105785048B | 公开（公告）日： | 2017-07-28 |
| 发明（设计）人： | 田志新 | 申请（专利权）人： | 同济大学 |
| 主分类号： | G01N33/68 | 分类号： | G01N33/68 |
| 代理公司： | 上海科盛知识产权代理有限公司31225 | 代理人： | 褚明伟 |
| 地址： | 200092 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种基于轻同位素近同重标记的整体蛋白质定量分析方法。首先将两组不同生理或病理条件的整体蛋白分别作为控制组与疾病组，分别进行赖氨酸ε‑氨基及N端氨基全部同重标记，分别标记为‑N(C5H11O2CH2)2和‑N(C5H11SCH2)2；同重标记后两组蛋白按等比例混合进行高分辨质谱和串级质谱分析得到一个数据组；对数据组进行定性、定量数据库搜索，得到蛋白质的ID及疾病组每一个蛋白质相对于控制组的相对比例，即疾病条件下所有蛋白的上调或下调情况。与现有技术相比，本发明的定量标记试剂不仅标记效率高，准确度高；而且便宜，易得，适用于整体蛋白质基于高分辨串级质谱分析的定量。 | ||
| 搜索关键词： | 基于 同位素 标记 整体 蛋白质 定量分析 方法 | ||
【主权项】：
一种基于轻同位素近同重标记的整体蛋白质定量分析方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将两组不同生理或病理条件的整体蛋白分别作为控制组与疾病组，分别进行赖氨酸ε‑氨基及N端氨基全部同重标记，分别标记为‑N(C5H11O2CH2)2和‑N(C5H11SCH2)2，其单个标记后氨基的质量差异为0.017759Da；(2)同重标记后两组蛋白按等比例混合进行高分辨质谱和串级质谱分析得到一个数据组；(3)对数据组进行定性、定量数据库搜索，得到蛋白质的ID及疾病组每一个蛋白质相对于控制组的相对比例，即疾病条件下所有蛋白的上调或下调情况，上调或下调倍数最大的蛋白即为与该疾病发生相关的蛋白。
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