[发明专利]一种处理养殖氨氮废水的固定化降解菌的制备方法

摘要

本发明公开了一种处理养殖氨氮废水的固定化降解菌的制备方法，属于菌体培养技术领域。本发明将凹凸棒土研磨成粉，和聚乙烯醇以及乙醛，在酸的催化下发生缩醛反应，在加入表面活性剂进行改性并振荡起泡，固化后制得多孔氨氮降解菌载体，再用不同氨氮浓度的养殖废水对池底污泥菌种进行筛选，优选出氨氮降解菌，固定到载体上，从而得到处理养殖氨氮废水的固定化降解菌的制备方法。实例证明，本发明操作简便，反应条件温和，无需高温高压，不仅利用固定化降解菌解决了养殖废水中氨氮含量较高的问题，而且降低了养殖废水中氨氮盐的含量，同时也减少了处理过程中带来的二次污染，是一种环保工艺。

主权项

 一种处理养殖氨氮废水的固定化降解菌的制备方法，其特征在于具体制备步骤为：（1）将50～60g凹凸棒土放入刚玉研钵中，研磨20～30min后过200目标准筛，得到凹凸棒土粉末，在带有搅拌器、温度计和滴液漏斗的1L三口烧瓶中加入80～100mL质量浓度为10%聚乙烯醇溶液和等体积的浓度为0.3mol/L硫酸溶液，启动搅拌器进行搅拌，在搅拌的过程中通过滴液漏斗继续滴加4～5mL质量浓度为30%丁醛溶液，得反应液；（2）将反应液移入1L烧杯中，向里加入反应液总质量0.5%的十二烷基苯磺酸钠和10～20g上述制得的凹凸棒土粉末，再将烧杯放入60～70℃的水浴锅中，于摇床上振荡反应5～7h，待反应液逐渐粘稠，产生的泡沫体积变为原料体积的2～3倍后，移入恒温箱中，在50～60℃下固化1～2h；（3）将上述固化后的泡沫状载体用去离子水反复冲洗3～5遍，去除未反应的硫酸和丁醛，自然晾干后放入气流粉碎机，粉碎成粒径为5～8mm的小颗粒，即得自制氨氮降解菌载体，备用；（4）称取200～300g葡萄糖、3～5g硫酸镁、5～7g磷酸氢二钾、5～6g磷酸二氢钾和2～4g氯化钠以及500～600mL氨氮浓度为100mg/L的养殖废水，搅拌均匀后制得驯化培养基，按接入量为10%将鱼类养殖池池底污泥加入到驯化培养基中，放入恒温箱，于25～30℃下培养5～6天；（5）培养结束后挑选长势最好的菌落转接于新的驯化培养基中，并以100mg/L的梯度增加养殖废水的氨氮浓度，重复上述步骤反复驯化培养，直至养殖废水中氨氮浓度达到500mg/L时，用去离子水淋洗培养基表面菌丝，收集淋洗液即为优选出的氨氮降解菌丝悬浮液；（6）量取500～600mL上述得到的菌丝悬浮液装入1L烧杯中，加入20～30g备用的自制氨氮降解菌载体和3～5g海藻酸钠粉末，放入漩涡振荡仪中以20～30W功率漩涡振荡混匀，再用蠕动泵以5mL/min速率逐滴滴入10～15mL质量浓度为5%的氯化钙饱和硼酸溶液进行固定化反应3～5h，反应结束后移入布氏漏斗，用无菌水抽滤洗涤后，于4～6℃环境下保存，即得处理养殖氨氮废水的固定化降解菌。