[发明专利]一种新的牛磺熊去氧胆酸含量以及有关物质的检测方法

摘要

本发明公开了一种新的牛磺熊去氧胆酸含量以及有关物质的检测方法，所述有关物质为牛磺鹅去氧胆酸和熊去氧胆酸，包括：制备对照品溶液和对照品供试品溶液；分别注入液相色谱仪中，记录色谱图中牛磺熊去氧胆酸的峰面积，按照外标法，以无水牛磺熊去氧胆酸来计算HPLC含量；制备杂质对照品溶液和样品溶液；分别注入液相色谱仪中，记录色谱图中牛磺鹅去氧胆酸和熊去氧胆酸的峰面积，再按照外标法计算牛磺熊去氧胆酸样品中有关物质的大小。本发明采用高效液相色谱法应用RID检测器。在同一个液相色谱条件下有效的分离和准确定量检测牛磺熊去氧胆酸和熊去氧胆酸两种极性相差比较大的胆酸类物质。

主权项

1.一种新的牛磺熊去氧胆酸含量以及有关物质的检测方法，所述有关物质为牛磺鹅去氧胆酸和熊去氧胆酸，其特征在于包括以下步骤：A、取牛磺熊去氧胆酸‑sigma对照品为已知对照品，用稀释剂溶解成浓度为0.5mg/ml的对照品溶液，取牛磺熊去氧胆酸样品用稀释剂溶解为浓度为0.5ml/ml的对照品供试品溶液；B、分别取对照品溶液对照品供试品溶液各20ul注入液相色谱仪中，记录色谱图中牛磺熊去氧胆酸的峰面积，按照外标法，以无水牛磺熊去氧胆酸来计算HPLC含量，不小于99%；C、取中检所对照品牛磺鹅去氧胆酸、熊去氧胆酸，再用流动相溶解成浓度为5ug/ml的杂质对照品溶液，取牛磺熊去氧胆酸样品用稀释剂溶解为浓度为0.5mg/ml的样品溶液；D、分别取杂质对照品溶液、样品溶液各20ul注入液相色谱仪中，记录色谱图中牛磺鹅去氧胆酸和熊去氧胆酸的峰面积，再按照外标法计算牛磺熊去氧胆酸样品中有关物质的大小，牛磺鹅去氧胆酸和熊去氧胆酸不超过1.0%和0.5%；所述流动相按以下方法制得：按0.1mol/L氯化铵水溶液：四氢呋喃：甲醇=5:2:3的比例混合后，用三乙胺调节溶液pH为7.00；所述的液相色谱仪中采用C4色谱柱，流速：1.0ml/min， 柱温：40℃，检测器采用示差折光检测器。