[发明专利]基于免疫磁分离以及生物催化的微生物浓度检测方法

摘要

本发明公开了一种基于免疫磁分离以及生物催化的微生物浓度检测方法，本发明先通过第一生物识别元件修饰的免疫磁性元件分离并富集目标微生物，提高了目标微生物的浓度和纯度；然后在一种纳米元件上同时修饰第二生物识别元件以及预定酶，通过三明治夹心方式在检测体系中引入催化生物反应的酶，利用预定酶催化生物反应改变待催化溶液的pH值；最后加入酸碱指示剂，并利用酸碱指示剂的颜色变化测定待测样本中目标微生物含量。该方法兼有免疫磁分离的纯化富集特点、生物催化的催化放大特点和酸碱指示剂的简单测定特点，可有效提高检测灵敏度，减少检测时间，简化检测过程，降低检测成本。

主权项

一种基于免疫磁分离以及生物催化的微生物浓度检测方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：S1、利用目标微生物的第一生物识别元件修饰的免疫磁性元件对所述目标微生物进行捕获，形成磁性元件‑目标微生物复合物，并通过磁场对所述磁性元件‑目标微生物复合物进行分离，实现样品中少量目标微生物的特异性分离富集；S2、利用预定酶和所述目标微生物的第二生物识别元件共同修饰的纳米元件与所述磁性元件‑目标微生物复合物进行结合，形成磁性元件‑目标微生物‑纳米元件‑酶复合物；S3、利用所述磁性元件‑目标微生物‑纳米元件‑酶复合物中的所述预定酶催化与所述预定酶对应的待催化溶液，改变所述待催化溶液的pH值；S4、检测催化反应后所述待催化溶液的pH值，根据所述pH值得到所述磁性元件‑目标微生物‑纳米元件‑酶复合物中所述预定酶的浓度，根据所述预定酶的浓度确定所述目标微生物的浓度。