[发明专利]用于辨识核苷酸基因多型性的基因型鉴定芯片的双重等位基因特异性聚合酶链锁反应的方法

摘要

本发明提供一种用于辨识核苷酸基因多型性的基因型鉴定芯片的双重等位基因特异性聚合酶链锁反应的方法，该方法使用的正向与反向引物皆以等位基因特异性位点为引物的3’端终点，不须使用特殊碱基的引物，并能容易的直接依等位基因特异性位点两旁的序列进行设计，并且结合核酸螯合试剂进行多重聚合酶链锁反应，再以基因型鉴定芯片进行检测。

主权项

一种用于辨识核苷酸基因多型性的基因型鉴定芯片的双重等位基因特异性聚合酶链锁反应的方法，包含：(a)利用一对以上的引物组并通过多重单一核苷酸多型性聚合酶链锁反应扩增待测核酸样本以产生扩增产物，其中所述聚合酶链锁反应中加入核酸螯合染剂，且所述核酸螯合染剂为SYBR green核酸染料；以及(b)以表面固定有辨识所述等位基因特异性的探针的基因型鉴定芯片鉴定所述扩增产物，其中所述引物组包含至少四条等位基因特异性引物，至少两条等位基因特异性引物与所述核酸样本的正股结合，且该等位基因特异性引物3’端终点与等位基因特异性位点互补，以及至少两条等位基因特异性引物与所述核酸样本的反股结合，且所述等位基因特异性引物3’端终点与等位基因特异性位点互补。