[发明专利]一种低分子量热凝胶的发酵方法

摘要

一种高产低分子量热凝胶的发酵方法，属于微生物发酵技术领域。本发明将筛选得到的高产热凝胶菌株土壤杆菌ATCC 31749和热凝胶内切酶菌株哈茨木霉GIM 3.442分别培养，然后在高产热凝胶菌株产热凝胶的起始点，将二者按照一定比例混合，同时加入麸皮，通过过程优化实现发酵法生产高产低分子量的热凝胶。本发明以廉价的麸皮作为原料之一，在提高发酵法生产热凝胶产量的同时，降低了热凝胶的分子量，省去了复杂的热凝胶内切型分解酶的提取纯化过程，获得的低分子量热凝胶降低了以热凝胶为原料制备热凝胶寡糖的成本，同时为提高其他多糖的产量及降低其分子量提供了新的方法。

主权项

1.一种低分子量热凝胶的发酵方法，其特征是将筛选得到的产热凝胶菌株和热凝胶内切酶菌株分别培养，然后将二者按照一定比例混合，同时加入麸皮，通过过程优化实现发酵法生产分子量范围为8.93kDa～90.01 kDa的低分子量热凝胶；具体步骤为：（1）从已报道的菌株中分别选择产热凝胶菌株土壤杆菌ATCC 31749和热凝胶内切酶菌株哈茨木霉GIM 3.442；筛选得到理想的氮源；（2）将产热凝胶的菌株土壤杆菌ATCC 31749划线接种于平板上，30℃培养2d，然后挑取单菌落接种于种子培养基中，进行14‑18h的种子活化培养；产热凝胶内切酶的菌株哈茨木霉GIM 3.442划线接种于平板上，30℃培养4d，然后挑取单菌落接种于种子培养基中，进行种子活化培养16‑20h；将经过种子活化培养的产热凝胶菌株及热凝胶内切酶菌株继续分别按照5%的接种量接种于各自的发酵培养基中，均分别发酵培养16‑18h；整个发酵培养温度和转速均分别为25‑32℃和180‑220 rpm；（3）将已发酵培养16‑18h的热凝胶内切酶菌株，按照产热凝胶菌株:热凝胶内切酶菌株菌体干重比1:1.4‑1:9.8加入到产热凝胶菌株中进行耦合发酵，并加入麸皮10‑30g/L，耦合发酵72‑192h，得到8.93kDa～90.01 kDa的低分子量热凝胶；整个发酵培养温度和转速均分别为25‑32℃和180‑220 rpm。