[发明专利]多个核酸靶标的分析方法

摘要

本公开提供即使同时检测的核酸靶标的种类增加，检测荧光的光学系统也不变得复杂，能通过小型、廉价的构成分析多个核酸靶标的方法。本公开涉及的检测装置具备PCR处理部、边界检测部和检测部，所述PCR处理部对在流路中流淌的第1液滴至第4液滴进行PCR处理，所述边界检测部检测从PCR处理后的第1液滴至第4液滴输出的荧光强度，并基于荧光强度，获得在第5流路中流淌的第1液滴至第4液滴各自之间的边界，所述检测部基于荧光强度和第1液滴至第4液滴各自之间的边界，获得具有第1阈值以上的荧光强度的第2液滴和第4液滴的数，并基于第2液滴和第4液滴的数检测对象核酸靶标中是否包含选自第1核酸靶标和第2核酸靶标中的至少1种。

主权项

一种检测方法，是使用微流路芯片来检测第1核酸靶标和第2核酸靶标的检测方法，包括：(a)在检测装置中设置微流路芯片，所述检测装置具备PCR处理部、PCR反应器、荧光检测部和检测电路，所述微流路芯片具备第1流路、第2流路、第3流路、第4流路和第5流路，所述第1流路的一端、所述第2流路的一端以及所述第3流路的一端与所述第4流路连接，所述PCR反应器位于所述第4流路和所述第5流路的之间，(b)通过(ⅰ)从所述第1流路的另一端依次供给第1水溶液、第1油和第2水溶液，(ⅱ)从所述第2流路的另一端供给样品水溶液，和(ⅲ)从所述第3流路的另一端供给第2油，从而使由所述第1水溶液和所述样品水溶液组成的第1液滴、由所述样品水溶液组成的第2液滴、由所述第2水溶液和所述样品水溶液组成的第3液滴以及由所述样品水溶液组成的第4液滴依次通过所述第4流路，其中，所述第1水溶液具有第1DNA，所述第1DNA具有与所述第1核酸靶标互补的序列、并且被第1荧光色素修饰，所述第2水溶液具有第2DNA，所述第2DNA具有与所述第2核酸靶标互补的序列、并且被第2荧光色素修饰，(c)将通过所述第4流路到达所述PCR反应器的所述第1液滴至所述第4液滴，通过所述PCR处理部进行PCR处理，使所述PCR处理后的所述第1液滴至所述第4液滴通过所述第5流路，(d)所述第1液滴至所述第4液滴在所述第5流路中流淌时，通过所述荧光检测部，检测从所述第1液滴至所述第4液滴输出的荧光强度，(e)基于所述荧光强度，获得在所述第5流路中流淌的所述第1液滴至所述第4液滴各自之间的边界，(f)通过所述检测电路，基于所述荧光强度、和所述第1液滴至所述第4液滴各自之间的边界，获得具有第1阈值以上的荧光强度的所述第2液滴和所述第4液滴的数量，并且基于所述第2液滴和所述第4液滴的数量，检测所述样品水溶液中是否包含选自所述第1核酸靶标和所述第2核酸靶标中的至少1种。