[发明专利]一种高纯度灰树花多酚组分的制备方法

摘要

本发明涉及一种高纯度灰树花多酚组分的制备方法，属于功能食品的功能因子和药物领域。通过超声波辅助浸提技术制备灰树花多酚粗组分，利然后用超滤膜截留技术去除其中的多糖和蛋白等生物大分子，最后采用大孔吸附树脂NKA‑Ⅱ柱层析‑制备型高效液相色谱的串联分离纯化技术，制备多种高纯度的灰树花多酚类化合物单体。本发明制备方法快速高效，可同时制备17种灰树花多酚类化合物单体，产品的纯度高。所制备的灰树花多酚类化合物单体均具有较强的DPPH自由基和羟自由基清除率及较强的还原力，大多数多酚类化合物单体能够抑制α‑葡萄糖苷酶活性，具有有效地保护人体细胞组织、心脑血管循环系统及抗癌、延缓衰老和辅助降血糖等生理作用。

主权项

一种高纯度灰树花多酚组分的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：（1）预处理：将灰树花子实体干制品粉碎成粉末，过40～80目筛备用；（2）浸提：取灰树花粉末加入蒸馏水中，利用超声波辅助提取技术浸提2‑4次，合并提取液，经板框过滤去除残渣；（3）膜过滤：通过膜过滤装置进行过滤，截留蛋白及多糖，获得的滤液经浓缩、干燥后获得灰树花多酚粗提物；（4）分离纯化：将灰树花多酚粗提物复溶于去离子水中，采用柱层析‑制备型高效液相色谱串联分离纯化技术进行分离纯化；所述的超声辅助浸提的条件为：以水为提取溶剂，料液重量比为1：10‑1：50，超声温度30‑70℃，超声时间30‑90 min，超声功率100‑400w；所述的过滤膜为截留分子量为5 kD的超滤膜，滤液所采用的干燥方法为真空冷冻干燥或离心喷雾干燥；所述的柱层析的填料为：NKA‑Ⅱ型大孔吸附树脂，上样速度3 BV/h，吸附时间2 h，洗脱溶剂为20%‑60%乙醇溶液，洗脱速度3 BV/h；经吸附、洗脱收集洗脱液，减压浓缩至干得粗品，以50%甲醇复溶后经0.45 μm滤膜过滤；制备型反相C18色谱柱，色谱柱规格：内径20 mm、长度250 mm、C18硅胶填料粒径5 μm，检测波长280nm，进样量1 mL，流速5‑10 mL/min，柱温30℃，采用 A:甲醇‑B: 0.1%甲酸进行线性梯度洗脱，洗脱程序为：（1）0～30 min：A: 5%+B: 95%→A: 60%+B: 40%；（2）30～35 min：A: 60%+B: 40%→A: 5%+B: 95%；（3）35～45 min：A: 5%+B: 95%。