[发明专利]细叶石斛的组培快繁方法

摘要

本发明属于植物组织培养领域，具体涉及一种细叶石斛的组培快繁方法。针对自然条件下细叶石斛自然萌发率低、现有技术中缺乏系统全面快速的繁育方法等问题，本发明提供一种细叶石斛的组培快繁方法，通过将细叶石斛的蒴果消毒后，以其种子为外植体，经过诱导、增殖分化及生根阶段，得到大量的细叶石斛组培苗。本发明技术方案建立组培快繁技术体系，实现了细叶石斛的大量人工繁育，为该植物以后的工厂化生产打下基础，并对于保护其野生资源，扩大其种植面积，以实现其种质资源的可持续利用，具有重要的现实意义和经济效益。

主权项

一种细叶石斛的组培快繁方法，其特征在于，包括以下步骤：a、外植体处理采摘细叶石斛蒴果作为外植体材料，进行消毒处理；所述消毒处理为：用73～75wt％的酒精浸泡15～30s后，再用0.09～0.1wt％氯化汞溶液或0.9～1wt％次氯酸钠溶液浸泡10～20min，无菌水冲洗；b、诱导培养剪开消毒后蒴果，将种子分散于诱导培养基上培养至长出原球茎；所述诱导培养基组成为：VW基础培养基+蔗糖19～21g/l+琼脂5.3～5.5g/l+香蕉100～150g/l，PH为5.4～5.6；c、增殖分化培养将步骤b中原球茎接种到增殖分化培养基上进行增殖分化培养至具2～4个叶片、高3～4cm的无根苗；所述增殖分化培养基组成为：VW基础培养基+萘乙酸0.05～0.15mg/l+蔗糖19～21g/l+琼脂5.3～5.5g/l+香蕉100～150g/l，PH为5.4～5.6；d、生根培养将步骤c中无根苗移植到生根培养基上培养为高7～8cm、有5～10条根的幼苗；所述生根培养基组成为：1/2VW基础培养基+吲哚丁酸0.1～0.3mg/l+蔗糖19～21g/l+琼脂5.3～5.5g/l+香蕉100～150g/l+土豆90～110g/l+活性炭2～2.5g/l，PH 5.4～5.6；e、炼苗培养将步骤d中幼苗进行炼苗，炼苗后移栽大棚培养。