[发明专利]一种诱导转基因花生发状根生物反应器产白藜芦醇的方法有效
申请号: | 201610025963.6 | 申请日: | 2016-01-15 |
公开(公告)号: | CN105463016B | 公开(公告)日: | 2020-03-17 |
发明(设计)人: | 庄伟建;马世伟;陈华;蔡铁城;邓烨;张冲 | 申请(专利权)人: | 福建农林大学 |
主分类号: | C12N15/84 | 分类号: | C12N15/84;A01H5/06;A01H6/54 |
代理公司: | 福州元创专利商标代理有限公司 35100 | 代理人: | 蔡学俊 |
地址: | 350002 福*** | 国省代码: | 福建;35 |
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摘要: | 本发明涉及一种诱导转基因花生发状根生物反应器产白藜芦醇的方法,属于生物技术领域。利用发根农杆菌介导将烟草根特异启动子NtR12驱动花生白藜芦醇合酶基因AhRESS载体pBI121‑NtR12‑AhRESS遗传转化花生,获得特异表达AhRESS的转基因花生发状根。建立了高产白藜芦醇的优化生产体系,花生发状根培养至第11天,经20mM的醋酸钠处理24h,发状根中白藜芦醇含量可提高0.8倍,是非转基因花生根系的5.34倍,含量达到148.62μg/g(FW),同时培养基中白藜芦醇为80.86μg/100mL,是花生本身根系白藜芦醇含量的7倍多。本发明为利用生物反应器培养花生发状根进而生产白藜芦醇奠定了基础。 | ||
搜索关键词: | 一种 诱导 转基因 花生 发状根 生物反应器 藜芦 方法 | ||
【主权项】:
一种诱导转基因花生发状根生物反应器产白藜芦醇的方法,其特征在于:包括以下步骤:(1)克隆烟草根特异启动子NtR12和花生白藜芦醇合酶基因AhRESS;(2)烟草根特异启动子NtR12驱动花生白藜芦醇合酶基因AhRESS表达载体pBI121‑NtR12‑AhRESS的构建;(3)pBI121‑NtR12‑AhRESS经发根农杆菌介导转化花生;(4)转pBI121‑NtR12‑AhRESS花生发状根液体悬浮培养;(5)醋酸钠诱导花生发状根使其白藜芦醇含量增加;(6)花生发状根白藜芦醇的提取及检测;(7)液体培养基中白藜芦醇的提取及检测。
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