[发明专利]一种黄素酶的定向固定化方法在审
| 申请号： | 201610015084.5 | 申请日： | 2016-01-08 |
| 公开（公告）号： | CN105524913A | 公开（公告）日： | 2016-04-27 |
| 发明（设计）人： | 叶鹏;许永娟 | 申请（专利权）人： | 浙江理工大学 |
| 主分类号： | C12N11/14 | 分类号： | C12N11/14 |
| 代理公司： | 浙江英普律师事务所 33238 | 代理人： | 陈小良 |
| 地址： | 310018 浙*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种黄素酶的定向固定化方法，本发明利用辅基黄素腺嘌呤二核苷酸(FAD)—脱辅基黄素酶间的生物亲和作用构建了定向固定化黄素酶。本发明所具有的优点主要在于：实现了黄素酶的高度定向化，更有利于其活性中心传递电子；定向亲和作用固定酶比普通吸附法固定化酶活性显著提高，为进一步构建高效率、低成本的生物催化体系提供了一种可行的方法。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 黄素 定向 固定 方法 | ||
【主权项】：
一种黄素酶的定向固定化方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一，利用氢氧化钠和氯乙酸钠对载体材料进行羧基化，氢氧化钠、氯乙酸钠和载体材料的质量比为20‑100:20‑100:1，获得羧基含量增加的S，以S‑COOH表示；步骤二，将黄素腺嘌呤二核苷酸上的氨基，与步骤一中所得S‑COOH进行反应，S‑COOH与黄素腺嘌呤二核苷酸的质量比为1:5‑30，经酰胺键连接，获得酶定向固定化的载体，以S‑FAD表示，并用还原剂对S‑FAD进行还原处理，还原剂与S‑FAD的质量比为8000‑500:5；步骤三，将脱辅基的黄素酶与步骤二中S‑FAD进行亲和吸附，脱辅基的黄素酶与载体的质量比为1:1‑5，获得定向固定化的黄素酶。
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