[发明专利]一种固定化金属离子亲和色谱材料及其制备和应用

摘要

本发明涉及一种新型固定化金属离子亲和色谱材料(IMAC)及其制备和应用。所述的新型IMAC材料在传统IMAC材料表面进行涂层改性，通过表面涂层孔隙筛分作用的选择性，使蛋白质裸露的末端进入涂层进而被金属离子捕获，而其他完整蛋白质传质阻力较大，很难进入涂层。该材料结合了IMAC材料的强亲和力及表面涂层孔隙筛分作用的高选择性，并进一步用于生物分析、生物化工、生物技术领域中组氨酸标签蛋白的特异性捕获、释放及纯化中。

主权项

1.一种固定化金属离子亲和色谱材料，其特征在于：利用表面聚合技术，通过功能单体的聚合和致孔剂的制孔效应，于颗粒状的固定化金属离子亲和色谱材料IMAC表面化学键合多孔网状高分子涂层，形成表面网状涂层改性的固定化金属离子亲和色谱材料;该网状涂层具有分子量大小依赖的选择透过性，蛋白末端组氨酸标签分子量小，可透过该材料表面网状涂层进而被IMAC捕获并纯化；而完整蛋白分子量大，被阻挡在涂层外无法被捕获；最终通过IMAC的金属螯合相互作用与该涂层的选择透过性的协同作用，实现组氨酸标签蛋白的高纯度纯化；涂层为多孔网状结构，与IMAC材料粘附稳定，不会脱落，涂层厚度为0.1 ‑ 100 nm，其中高分子上若干点通过支链和化学键连接形成三维网状结构，该涂层的孔隙率为0.1%‑90%，孔径分布为0.1 ‑ 20 nm。