[发明专利]一种副猪嗜血杆菌五价灭活疫苗的制备方法有效
| 申请号： | 201510620812.0 | 申请日： | 2015-09-25 |
| 公开（公告）号： | CN105148262B | 公开（公告）日： | 2018-07-10 |
| 发明（设计）人： | 李晓华;杨小燕;邱龙新;林标声;戴爱玲;赵国振 | 申请（专利权）人： | 龙岩学院 |
| 主分类号： | A61K39/116 | 分类号： | A61K39/116;A61K39/102;A61P31/04 |
| 代理公司： | 福州市鼓楼区京华专利事务所(普通合伙) 35212 | 代理人： | 王美花 |
| 地址： | 364000 福*** | 国省代码： | 福建;35 |
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| 摘要： | 本发明提供一种副猪嗜血杆菌五价灭活疫苗的制备方法，取菌株LYD1、菌株LYH5、菌株LY02、菌株LYW1和菌株LYC2并分别进行繁殖培养，得到菌株LYD1菌液、菌株LYH5菌液、菌株LY02菌液、菌株LYW1菌液及菌株LYC2菌液；将各菌液分别进行浓缩与灭活，之后按对应配比配制成总混合菌液；接着依次进行水相配制、油相配制及乳化操作。本发明所制得的副猪嗜血杆菌五价灭活疫苗不仅安全性良好，而且能够同时针对多种血清型的副猪嗜血杆菌引起的疾病进行防治。 | ||
| 搜索关键词： | 菌株 菌液 副猪嗜血杆菌 灭活疫苗 制备 混合菌液 水相配制 血清型 灭活 配比 乳化 相配 配制 繁殖 浓缩 疾病 防治 | ||
【主权项】：
1.一种副猪嗜血杆菌五价灭活疫苗的制备方法，其特征在于：包括如下具体操作步骤为：(1)繁殖培养：取菌株LYD1、菌株LYH5、菌株LY02、菌株LYW1和菌株LYC2并分别进行繁殖培养，得到菌株LYD1菌液、菌株LYH5菌液、菌株LY02菌液、菌株LYW1菌液及菌株LYC2菌液；其中，所述菌株LYD1为副猪嗜血杆菌菌株LYD1(Haemophilus parasuis)，于2015年07月21日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.11143；所述菌株LYH5为副猪嗜血杆菌菌株LYH5(Haemophilusparasuis)，于2015年07月21日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.11144；所述菌株LY02为副猪嗜血杆菌菌株LY02((Haemophilusparasuis)，于2015年07月21日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.11145；所述菌株LYW1为副猪嗜血杆菌菌株LYW1(Haemophilusparasuis)，于2015年07月21日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.11146；所述菌株LYC2为副猪嗜血杆菌菌株LYC2(Haemophilusparasuis)，于2015年07月21日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.11147；(2)浓缩与灭活：将步骤(1)所得各菌液分别进行浓缩，且菌株LYD1菌液、菌株LYW1菌液、菌株LYC2菌液均浓缩至菌液中的抗原含量为2.5×10 9CFU/mL，菌株LYH5菌液、菌株LY02菌液则均浓缩至菌液中的抗原含量为2.0×109CFU/mL；接着将浓缩后的各菌液分别进行灭活；(3)总混合菌液的制备：取已浓缩、灭活后的菌株LYD1菌液、菌株LYW1菌液及菌株LYC2菌液并按1:1:1的体积比混合，获得第一混合菌液；取已浓缩、灭活后的菌株LYH5菌液、菌株LY02菌液并按1:1的体积比混合，获得第二混合菌液；之后将所得第一混合菌液与第二混合菌液按1:1.5的体积比混合则得总混合菌液；(4)水相配制：按体积份取已灭菌的吐温‑80 4份、无菌检验合格的总混合菌液96份，并导入配液罐中，开启搅拌电机，匀速搅拌至吐温‑80完全溶解，获得水相；(5)油相配制：按体积份取注射用白油94份、司本‑80 6份并加至油相制备罐中，开启搅拌电机，匀速搅拌，同时开启导热油开关，125℃加热30min，冷却后即得油相；(6)乳化：取油相1.5体积份置于乳化罐内，开动电机1500‑2000r/min搅拌，同时缓缓加入水相1体积份，再以4000r/min乳化30min；乳化后，取样10mL并以3000r/min离心15min，若不分层则乳化所得乳化液即为所述副猪嗜血杆菌五价灭活疫苗；若有分层现象则将所得乳化液重复乳化直至不分层，最终即得所述副猪嗜血杆菌五价灭活疫苗。
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- 2014-05-13 - 2018-03-09 - A61K39/116
- 本发明提供一种ABC群脑膜炎球菌联合疫苗，其由A、C群脑膜炎球菌荚膜多糖分别与B群血清型4型(CMCC29356)脑膜炎球菌外膜蛋白囊(OMV)共价结合的多糖‑蛋白偶联物，以及B群ST‑4821基因型(xrsw341215)脑膜炎球菌外膜蛋白囊(OMV)组成。该疫苗可同时预防A、B、C群脑膜炎球菌侵袭性疾病，尤其针对2岁以下流脑高危人群预防，具有更好的保护效果，并且针对自然界A、B、C群脑膜炎球菌侵袭具有更好的特异性，更好的保护作用。
- 免疫原性组合物及其制备方法-201380017781.9
- 苏布哈什·维纳亚克·卡普雷;萨姆哈吉·尚卡尔·皮萨尔 - 印度血清研究所私人有限公司
- 2013-01-29 - 2018-02-06 - A61K39/116
- 本发明提供了包括来自脑膜炎奈瑟菌血清群X的荚膜多糖的一种免疫原性多糖蛋白质结合物，以及用来制备所述结合物的方法。本发明涉及由结合反应制备的脑膜炎奈瑟菌X糖‑载体蛋白质结合物。因此，本发明涉及多价脑膜炎球菌多糖蛋白质结合组合物，其包括来自血清群X的荚膜糖和来自A、C、W135、Y中的至少一个荚膜糖，其中i)多糖A C W135 X被机械地分级，而多糖Y被化学地分级；ii)，通过具有氰基化结合化学物质(cyanylation conjugation chemistry)的连接体(linker)将全部的糖都结合到载体蛋白；iii)在最终的结合物中所有的糖与蛋白质的比例为0.2‑0.6；并且iv)使用选自TT、DT和CRM197至少两种不同的载体蛋白质。
- 脑膜炎奈瑟球菌组合物及其方法-201680010914.3
- A·S·安德森;R·G·阿鲁穆加姆;J·E·法利;L·D·弗莱彻;S·哈里斯;K·U·詹森;T·R·琼斯;L·康德克;B·劳恩;J·L·佩雷斯;G·W·兹洛特尼克 - 辉瑞大药厂
- 2016-02-16 - 2017-10-13 - A61K39/116
- 一方面，本发明涉及包含具有SEQ ID NO1所示序列的第一多肽和具有SEQ ID NO2所示序列的第二多肽的组合物。在一个实施方案中，组合物包含约120μg/ml的包含SEQ ID NO1所示氨基酸序列的第一多肽，120μg/ml的包含SEQ ID NO2所示氨基酸序列的第二多肽，聚山梨酯80与第一多肽的摩尔比为约2.8，聚山梨酯80与第二多肽的摩尔比为约2.8，约0.5mg/ml铝，约10mM组氨酸和约150mM氯化钠。在一个实施方案中，一个剂量组合物的总体积为约0.5ml。在一个实施方案中，两个剂量的组合物诱导针对人中不同异源亚科A和亚科B菌株的杀菌效价。
- 疫苗制剂-201710133332.0
- L·汉德科;A·拉希德贝基 - 惠氏有限责任公司
- 2011-05-25 - 2017-08-22 - A61K39/116
- 免疫原性组合物包含多种与载体蛋白缀合的来自肺炎链球菌血清型1、3、4、5、6A、6B、7F、9V、14、18C、19A、19F和23F的荚膜多糖，还包含至少一种防腐剂，优选为2‑苯氧乙醇(2‑PE)。本发明含防腐剂的免疫原性组合物赋予对一种或多种微生物的抗性，并用于生产多剂量疫苗制剂，具有在选择的免疫原性组合物的不同抗原决定簇的长期稳定性方面的有利特性。还提供了用于测量疫苗制剂中一种或多种防腐剂功效的相关组合物和方法。
- 多价脑膜炎球菌衍生的多糖‑蛋白质缀合物及疫苗-201410415117.6
- R·P·赖亚尔 - 赛诺菲巴斯德公司
- 2004-05-07 - 2017-07-21 - A61K39/116
- 本发明描述了衍生的多糖‑蛋白质缀合物、包含一种或一种以上此类衍生多糖‑蛋白质缀合物的组合物以及使用它们免疫接种病人的方法。这些衍生多糖‑蛋白质缀合物是来自脑膜炎奈瑟氏球菌(Neisseria meningitidis)血清群A、C、W‑135和Y的纯化荚膜多糖，其中这些纯化荚膜多糖是经过衍生的、化学激活的和通过共价化学键的方式选择性地与载体蛋白质缀合的，从而形成了能够引起针对多种脑膜炎奈瑟氏球菌菌株长久免疫性的多糖‑蛋白质缀合物。
- 一种哈氏和溶藻弧菌二联灭活疫苗及工厂化制备技术-201710156735.7
- 陶家发;赖迎迢;孙承文;江小燕;罗霞;赵长臣;巩华;刘春花;黄志斌;陈总会 - 中国水产科学研究院珠江水产研究所
- 2017-03-16 - 2017-07-11 - A61K39/116
- 本发明为一种海水鱼弧菌病免疫防治二联灭活疫苗工厂化生产技术，通过对病原菌哈氏弧菌、溶藻弧菌逐级扩大培养，以500L发酵罐分别培养两种病原菌液，达到一定活菌数，添加甲醛液灭活，按一定比例混合，无菌分装，制成弧菌二联灭活疫苗。该疫苗对斜带石斑鱼等海水养殖鱼注射免疫保护率达到80％以上，浸泡免疫保护率达50％以上。本发明可进行弧菌二联灭活疫苗规模化生产，得到的二联疫苗可提高防治弧菌病免疫预防效果，疫苗可通过浸泡、注射进行免疫，成本低，使用方便，可减少抗生素等化学药物的使用。
- 一种维氏、嗜水气单胞菌二联灭活疫苗及规模化制备技术-201710156501.2
- 陶家发;赖迎迢;任燕;孙承文;江小燕;罗霞;赵长臣;巩华;刘春花;黄志斌 - 中国水产科学研究院珠江水产研究所
- 2017-03-16 - 2017-07-04 - A61K39/116
- 本发明为一种淡水鱼细菌性败血症免疫防治二联灭活疫苗及规模化生产技术。本发明采用发病鱼体中分离得到强毒株，规模化生产制成灭活疫苗，以注射、浸泡等方法进行免疫接种，对鲫鱼、草鱼等淡水养殖鱼类进行免疫，可达到良好的防病效果；同时克服单一灭活苗只针对一种病原菌的缺点，提供一种二联疫苗可一次施用同时抵御两种病原菌感染，提高免疫的效果，疫苗通过浸泡、注射或拌和饲料投喂均可方便施用。
- 一种副猪嗜血杆菌四价灭活疫苗-201611163456.5
- 郭莉莉;胡潇;宫晓;刘新文;申洪银 - 青岛易邦生物工程有限公司
- 2016-12-16 - 2017-05-31 - A61K39/116
- 本发明提供一种副猪嗜血杆菌四价灭活疫苗，其中抗原为灭活的副猪嗜血杆菌YBH04、YBH05、YBH12株和YBH13株。4型YBH04株的保藏编号为CGMCC No.5479、5型YBH05株的保藏编号为CGMCC No.5480、12型YBH12株的保藏编号为CCTCC M 2016636、13型YBH13株的保藏编号为CGMCC No.5501。本发明从优势流行菌株中筛选出免疫原性良好的副猪嗜血杆菌4型YBH04株、5型YBH05株、12型YBH12株和13型YBH13株作为疫苗制备菌株，分别接种于TSB营养肉汤培养基上培养，收获培养物，经甲醛溶液灭活，加入201佐剂混合乳化制成；用于预防由4、5、12、13型副猪嗜血杆菌引起的猪副嗜血杆菌病；此疫苗具有安全性好、免疫效力高且免疫期长等优点。
- 用于靶向治疗以治疗神经疾病的通用平台-201580052917.9
- J·T·巴比里;陈晨;A·普莱兹佩斯基;E·A·约翰逊;S·佩莱特 - 威斯康星州医药大学股份有限公司;威斯康星校友研究基金会
- 2015-09-29 - 2017-05-31 - A61K39/116
- 本发明提供将功能性、异源性化合物递送至特定细胞的通用递送平台，采用经修饰以包括异源性化合物的毒素。在一个实施方式中，所述毒素是AB5毒素。在一个实施方式中，AB5毒素是来自大肠杆菌的热不稳定性肠毒素(LT)，包括LTI、LTII、LTIIa、LTIIb、LTIIc和LT的其它重组形式。还提供了使用方法。
- 一种肺炎球菌缀合疫苗及其制备方法-201710024067.2
- 吴克;刘昊智;程超;王文灏 - 武汉博沃生物科技有限公司
- 2014-09-23 - 2017-05-17 - A61K39/116
- 本发明公开了一种肺炎球菌缀合疫苗，该结合疫苗为多价肺炎球菌多糖与两种或两种以上的载体蛋白经连接体而成的结合疫苗，其中，连接体为磁性纳米微球。该肺炎球菌缀合疫苗的制备方法将多价肺炎球菌多糖与两种或以上的载体蛋白分别与纳米微球经偶联而成。本发明提供的肺炎球菌缀合疫苗制备工艺简单，采用纳米微球为连接物的肺炎球菌缀合疫苗能够增强小鼠Th1型免疫应答，以及多糖特异性抗体的免疫持效性、特异性和亲和性，此外还可诱导小鼠产生轮状病毒抗体；具备两种疫苗的预防效果；因此具有十分广阔的应用前景。
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