[发明专利]基因工程菊粉酶及其以菊芋为原料制备结晶果糖的方法

摘要

本发明涉及酶的基因工程技术领域，具体涉及由基因工程重组菊粉酶I和菊粉酶II复配获得的复合酶制剂，及其用于以菊芋为原料制造高品质结晶果糖的技术。本发明通过将菊粉酶I和菊粉酶II以三种方式串联表达，再通过将三种重组酶合理的复配获得复合酶制剂。同时，建立了菊芋为原料生产高品质结晶果糖的酶解工艺，克服了单一菊粉酶作用时间长，效率低，或不能最终形成高含量的单一果糖的缺点，迅速高效的形成含量高达96％以上的果糖，再通过葡萄糖氧化酶和Ca²⁺将葡萄糖去除，得到100％结晶果糖。该工艺简单，节约经济成本，是一种生产结晶果糖的新工艺。采用本发明方法得到的结晶果糖产品，可广泛应用于医药、食品、饲料等重要领域。

主权项

1.一种重组基因工程菌，其特征在于，所述重组菌包含核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示的菊粉酶基因inuI和核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示的菊粉酶基因inuII，以及上述基因在同一宿主细胞中的串联表达；所述重组菌是以毕赤酵母菌GS115为宿主细胞以质粒pPIC9K为表达载体的a：优先表达菊粉酶I的重组酵母菌P.pastoris GS115/pPIC9K‑inuI‑inuII，或b：优先表达菊粉酶II的重组酵母菌P.pastoris GS115/pPIC9K‑inuII‑inuI，或c：无序表达菊粉酶I和菊粉酶II的重组酵母菌P.pastoris GS115/pPIC9K‑inuI/inuII。