[发明专利]一种快速、高通量提取植物基因组DNA的方法及应用

摘要

本发明属于分子生物学技术领域，具体涉及一种快速、高通量提取适用于PCR扩增的植物基因组DNA的提取方法，并进一步公开其应用。本发明所述方法通过SDS提取液的精心配比，降低了部分试剂的使用量，不仅所需试剂少，而且无需使用昂贵的酶及其它生化试剂。本发明所述提取DNA的方法不仅成本低廉，而且整个方法操作较为简单，且所述DNA的提取通量高、所需时间短。所得基因组DNA可广泛应用于群体遗传学、分子标记辅助育种、转基因植株筛选等需要大规模基因组提取的实验。

主权项

一种快速、高通量提取植物基因组DNA的方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)取待提取的植物组织加入SDS提取液混匀，并充分研磨；所述SDS提取液配方为：80‑120mM Tris·HCl，40‑60mM EDTA，80‑120mM NaCl，0.5‑1.5％w/v SDS，pH8.0；(2)将研磨后的样品于60‑70℃加热5～10min，并于室温下高速离心处理；随后吸取样品上清液，并加入等体积的异丙醇混匀，室温下静置处理；(3)将静置处理后的样品再次高速离心处理，并除去上清液，随后加入质量浓度不低于70％的乙醇，充分混匀；(4)将混合后的样品再次高速离心处理，完全弃去上清液后，将所述样品干燥处理；(5)向干燥后的样品中加入双蒸水，于35‑40℃温度下静置，并常规保存，即得所需的植物基因组DNA作为模板进行后续的PCR反应。