[发明专利]一种大花朱顶红组培快繁殖方法

摘要

本发明公开了一种大花朱顶红组培快繁殖方法，涉及大花朱顶红（Hippeastrum vittatum）通过无性快繁技术快速获得大量大花朱顶红组培苗的方法。本发明以大花朱顶红‘Red lion’鳞茎为外植体，经过外植体消毒、不定芽诱导培养、增殖培养、生根培养、炼苗及移栽等步骤建立了一种大花朱顶红组培快繁殖方法，为今后‘Red lion’等观赏价值高的朱顶红品种在国内的普及提供有利条件和基础。

主权项

一种大花朱顶红组培快繁殖方法，其特征在于包括以下步骤： （1）外植体消毒：选取健壮的大花朱顶红‘Red lion’鳞茎为外植体，用自来水冲净表面，将鳞茎去除叶片及外层膜质磷片，切去种球顶部四分之一及根部，然后用流水下冲洗1～3h后置于超净工作台中，先用75%乙醇消毒5～30s后用无菌水洗3～5次，再用0.1%升汞溶液消毒1～10min，用无菌水冲洗4～6次再用无菌滤纸擦干表面的水珠后备用；（2）芽诱导培养：将步骤（1）处理后的鳞茎剥去外层鳞片，用无菌滤纸吸干水分，纵向分切鳞片，每层鳞片切成长5～6mm，宽3～4mm的切块并接种到诱导培养基上,先在25～28℃条件下全暗培养7～10天，然后置于每天光照10～12小时，光照强度为1500～3000lx，直至诱导形成丛生芽；（3）增殖培养：将步骤（2）培养获得的丛生芽长至约2.5～3.5cm时分切至增殖培养基上进行增殖培养，接种后先在25～28℃条件下全暗培养7～10天，然后置于每天光照12～16小时，光照强度为1500～2500lx，置于培养温度为25～28℃的条件下培养，多次反复切割进行继代培养，得到丛生芽；（4）生根培养：将步骤（2）或（3）过程获得的高度约为3.5～4.5cm的丛生芽芽分切接种到生根培养基上进行生根培养，接种后先在25～28℃条件下全暗培养3～7天，然后置于每天光照12～15小时，光照强度为2000～3000lx，培养温度为25～28℃的条件下培养至生根；（5）炼苗移栽：将步骤（4）获得的高约7～9cm、生长健壮、根系粗壮、叶色浓绿的生根试管苗去瓶盖置于自然光照下炼苗3～5天后，将试管苗从培养瓶中取出，洗掉根部培养基，栽入由营养土:沙土＝3:1混合成的基质,置于光照培养箱内培养，每天以1/2MS大量元素营养液给幼苗浇水，保持湿度，待幼苗成活后再移栽大田，小苗移栽后选择透光率为60%～80%的遮阴处理。