[发明专利]一种富硒北冬虫夏草的培育方法

摘要

本发明公开了一种富硒北冬虫夏草的培育方法，包括菌种分离、固体培养、转接、液体培养和栽培五个步骤。本发明所述富硒北冬虫夏草的培育方法培育富硒北冬虫夏草生长周期短、产量高、成活率高，得到的富硒北冬虫夏草硒含量高，具有较高的营养和药用价值。

主权项

一种富硒北冬虫夏草的培育方法，其特征在于，包括以下步骤：第一步：将北冬虫夏草子实体用75％酒精灭菌2‑5min，然后用灭菌水清洗后获得菌种；第二步：按重量份将50‑100份马铃薯切成片后加入300‑500份水中煮沸20‑50min，然后用多层纱布过滤，在滤液中加入5‑10份琼脂、3‑5份蛋白胨、3‑5份葡萄糖、2‑3份蔗糖、1‑4份红糖、1‑2份蚕蛹粉、0.1‑0.3份磷酸二氢钾、0.05‑0.1份硫酸镁、0.02‑0.05份硫酸锌、3‑5份甘草、1‑3份五味子、5‑10份硒酵母，其中，硒酵母中硒的质量分数为3‑5‰，加热至琼脂完全熔化后，加入热水补足300‑500份，然后分装在试管内，并用棉塞塞紧试管口，然后放入灭菌锅中，在121‑125℃下灭菌25‑28min，灭菌结束后趁热将试管倾斜，冷却后获得固体培养基；第三步、将第一步中获得的菌种接种在第二步中获得的固体培养基中，在20‑22℃恒温箱中培养15‑20天，移出恒温箱，在22‑25℃的室内散射光照4‑5天，选出菌丝生长平整，色泽桔红，无杂菌的富硒北冬虫夏草获得母种；第四步：按重量份在1000份水中加入20‑25份葡萄糖、1‑3份果胶、2‑5份淀粉、12‑15份蛋白胨、0.3‑1份磷酸二氢钾、0.3‑1份硫酸镁、16‑20份硒酵母、1‑4份红糖、1‑2份蚕蛹粉、0.05‑0.1份硫酸铁、0.05‑0.1份硫酸锌、0.01‑0.05份硫酸铁、3‑5份甘草、1‑3份五味子、2‑5份刺五加、0.01‑0.03份维生素，其中，硒酵母中硒的含量为3‑5‰，煮沸15‑20min，冷却至室温后用多层纱布过滤，将滤液装入盐水瓶中，用棉塞塞紧后在120℃保持灭菌40min，冷却至室温后获得液体培养基；将第三步中获得的母种转接到液体培养基中，然后将液体培养基放入往复式摇床上，在112‑118r/min、20‑22℃下震动培养3‑7天后即成液体菌种；第五步：按重量份在培养瓶中加入30‑45份水、20‑35份大米、5‑8份土豆、3‑8份豆饼粉、5‑10份蚕蛹粉、2‑5份胡萝卜、0.02‑0.05份维生素B1、0.01‑0.03份硝酸钠，搅拌均匀后得到培养基，将培养基放入灭菌锅中，在120‑122℃条件下灭菌35‑38min，然后在接种箱中将液体菌种接种在培养基中，然后送入培养室中，在18‑20℃下避光培养10天，在培养瓶的封口处扎孔透气，然后调节温度为22‑25℃培育50‑60天后得到所述富硒北冬虫夏草。