[发明专利]基于杂交连接法检测非编码RNA转录水平的方法在审
| 申请号： | 201510018063.4 | 申请日： | 2015-01-14 |
| 公开（公告）号： | CN104593496A | 公开（公告）日： | 2015-05-06 |
| 发明（设计）人： | 周征;曾珍;王丹;王子天;陈润生 | 申请（专利权）人： | 湖南大学 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 长沙朕扬知识产权代理事务所(普通合伙) 43213 | 代理人： | 杨斌 |
| 地址： | 410082 湖南*** | 国省代码： | 湖南;43 |
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| 摘要： | 一种基于杂交连接法检测非编码RNA转录水平的方法，包括以下步骤：经提取、提纯获得含待检测目标ncRNA的样本液；配制杂交反应体系，使样本液中的待检测目标ncRNA与两个完全互补配对的DNA片段进行杂交，形成ncRNA-oligos杂合链；配制连接反应体系，用T4DNA连接酶对得到的ncRNA-oligos杂合链进行缺口修复，得到含HL-DNA的待检测样本；以上述得到的含HL-DNA的待检测样本为模板，直接用于荧光定量PCR的检测，根据检测结果分析待检测目标ncRNA的转录水平。本发明的方法简便、快速、安全，能准确地进行定量分析待测非编码RNA，提高实验结果的可重现性。 | ||
| 搜索关键词： | 基于 杂交 连接 检测 编码 rna 转录 水平 方法 | ||
【主权项】：
一种基于杂交连接法检测非编码RNA转录水平的方法，包括以下步骤：(1)经提取、提纯获得含待检测目标ncRNA的样本液；(2)配制杂交反应体系，使上述样本液中的待检测目标ncRNA与两个完全互补配对的DNA片段进行杂交，形成ncRNA‑oligos杂合链；(3)配制连接反应体系，用T4DNA连接酶对上述得到的ncRNA‑oligos杂合链进行缺口修复，得到含HL‑DNA的待检测样本；(4)以上述得到的含HL‑DNA的待检测样本为模板，直接用于荧光定量PCR的检测，根据检测结果分析待检测目标ncRNA的转录水平。
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