[发明专利]利用DNA纹身免疫制备抗体的方法在审
| 申请号： | 201410857000.3 | 申请日： | 2014-12-31 |
| 公开（公告）号： | CN104479016A | 公开（公告）日： | 2015-04-01 |
| 发明（设计）人： | 洪扬;刘明 | 申请（专利权）人： | 广州吉赛生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C07K16/24 | 分类号： | C07K16/24;C07K16/42;C07K16/06 |
| 代理公司： | 广州市越秀区哲力专利商标事务所(普通合伙) 44288 | 代理人： | 汤喜友 |
| 地址： | 510000 广东省广州市广州高新技术产业*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了利用DNA纹身免疫制备抗体的方法，该方法包括构建抗原蛋白表达载体：将目的基因的cDNA片断通过逆转录PCR扩增的方式从宿主细胞基因组中调出，然后克隆到表达载体中；制备纯化的质粒DNA：利用大肠杆菌大量制备纯化的质粒DNA；质粒DNA免疫：将质粒DNA纹身的方式注射入动物表皮内进行表达及免疫；分离和纯化抗体：杂交瘤筛选及单克隆抗体的分离，纯化和收集血清进行多克隆抗体提取及纯化。本发明所述的方法，采用DNA质粒免疫动物的方法取代传统的肽链及蛋白质免疫，解决传统抗体生产方法中存在的抗体滴度低，特异性差及不能识别天然抗原表位的缺陷。 | ||
| 搜索关键词： | 利用 dna 纹身 免疫 制备 抗体 方法 | ||
【主权项】：
利用DNA纹身免疫制备抗体的方法，其特征在于，该方法包括1)构建抗原蛋白表达载体：将目的基因的cDNA片断通过逆转录PCR扩增的方式从宿主细胞基因组中调出，然后克隆到表达载体中；2)制备纯化的质粒DNA：利用大肠杆菌大量制备纯化的质粒DNA；3)质粒DNA免疫：将质粒DNA以纹身的方式注射入动物表皮内进行表达及免疫；4)分离和纯化抗体：采用杂交瘤筛选单克隆抗体分离纯化或收集血清进行多克隆抗体提取纯化。
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