[发明专利]一种基于甲基化环状DNA分子的突变方法在审
| 申请号： | 201410593852.6 | 申请日： | 2014-10-30 |
| 公开（公告）号： | CN104404029A | 公开（公告）日： | 2015-03-11 |
| 发明（设计）人： | 蒋国成;陈旭;陈刚;佟勇 | 申请（专利权）人： | 依科赛生物科技（太仓）有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 上海卓阳知识产权代理事务所(普通合伙) 31262 | 代理人： | 马伟 |
| 地址： | 215434 江苏省苏州市*** | 国省代码： | 江苏;32 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明涉及一种基于甲基化环状DNA分子的突变方法：a）PCR反应获得带有特定突变的环形单链DNA：以甲基化环状DNA为模板，使用带突变位点的突变引物，采用高保真的耐热DNA聚合酶和高温DNA连接酶进行扩增；b）将步骤a）的PCR产物使用限制性内切酶DpnI消化，去除甲基化模板；c）将步骤b）中的消化产物转入感受态细胞中，所述的带有特定突变的环状单链DNA修复为带有特定突变的环状双链DNA，最终得到突变后的质粒。本发明的方法可实现一步多点突变，且操作简单，突变率高，单点突变阳性率95%以上，相距1kb以上两点、三点突变阳性率在60%以上。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 基于 甲基化 环状 dna 分子 突变 方法 | ||
【主权项】：
一种基于甲基化环状DNA分子的突变方法，其特征在于，包括以下步骤：a）PCR反应获得带有特定突变的环形单链DNA：以甲基化环状DNA为模板，使用带突变位点的突变引物，采用高保真的耐热DNA聚合酶和高温DNA连接酶进行扩增；b）将步骤a）的PCR产物使用限制性内切酶Dpn I消化，去除甲基化模板；c）将步骤b）中的消化产物转入感受态细胞中，所述的带有特定突变的环状单链DNA修复为带有特定突变的环状双链DNA，最终得到突变后的质粒。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于依科赛生物科技（太仓）有限公司，未经依科赛生物科技（太仓）有限公司许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201410593852.6/，转载请声明来源钻瓜专利网。
